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Φb×broth 培养基(1 L,pH 7.5)

发布:2026-07-16 浏览:0次

Φb×broth 培养基(1 L,pH 7.5)

基本属性

属性内容
产品名称Φb×broth 培养基(Phage Broth)
规格1 L
pH7.5
保存条件4 ℃密封保存
灭菌方式高温高压灭菌(121 ℃,15~20 min)
主要用途M13丝状噬菌体扩增、噬菌体展示文库制备

配方组成(1 L体系)

组分用量终浓度CAS号
Tryptone(胰蛋白胨)20 g2%(W/V)91079-40-2
Yeast Extract(酵母提取物)5 g0.5%(W/V)8013-01-2
MgSO₄·7H₂O(七水合硫酸镁)5 g0.5%(W/V)10034-99-8
1N KOH适量调pH至7.51310-58-3
去离子水定容至1 L

配制步骤

  1. 称取20 g Tryptone5 g Yeast Extract5 g MgSO₄·7H₂O,置于1 L烧杯中。

  2. 加入约800 mL去离子水,充分搅拌至完全溶解。

  3. 滴加1N KOH,调节pH至7.5(缓慢操作,充分混匀)。

  4. 加去离子水定容至1 L,充分混匀。

  5. 高温高压灭菌(121 ℃,15~20 min),冷却后4 ℃密封保存

关键注意事项

  • ⚠️ 试剂特性:Tryptone、Yeast Extract易吸潮结块;MgSO₄·7H₂O易风化(失去结晶水),称量后立即密封各试剂瓶,称量快速高效,确保用量精准。

  • ⚠️ pH调节:使用1N KOH调节pH至7.5(非NaOH),需缓慢滴加并充分混匀,避免局部碱性过强。灭菌后pH轻微偏移(≤±0.1)不可二次调节,防止引入杂菌。

  • ⚠️ 分装与保存:分装容器需耐高温高压且洁净无菌,灭菌前检查密封性;冷却时避免密封过紧,防止容器因负压变形。

Φb×broth vs 2×YT vs LB 对比

比较项LB培养基2×YT培养基Φb×broth(本方案)
Tryptone1%(10 g/L)1.6%(16 g/L)2%(20 g/L)
Yeast Extract0.5%(5 g/L)1%(10 g/L)0.5%(5 g/L)
NaCl1%(10 g/L)0.5%(5 g/L)
Mg²⁺来源MgSO₄·7H₂O 0.5%
pH调节剂NaOHNaOHKOH
pH7.07.07.5
主要用途常规培养M13扩增/大提M13丝状噬菌体扩增

💡 核心区别:Φb×broth用MgSO₄替代NaCl,并提供Mg²⁺离子。Mg²⁺稳定噬菌体颗粒结构,是M13丝状噬菌体高效扩增的关键。

使用指南——M13噬菌体扩增

步骤操作
接种含M13噬菌体的菌液至Φb×broth培养基(起始OD₆₀₀≈0.05~0.1)
37 ℃振荡培养6~8小时
离心去除菌体,上清含高滴度M13噬菌体颗粒
PEG/NaCl沉淀纯化噬菌体

主要应用

  • M13丝状噬菌体扩增与制备核心应用

  • 噬菌体展示文库扩增

  • 噬菌体感染实验

  • 噬菌体颗粒稳定性研究