产品快速导航
地址:深圳市龙岗区平湖街道禾花社区华南大道一号华南国际皮革皮具原辅料物流区二期3A-053
电话:19850855600
手机:19850855600
邮箱:support@fwkbio.com
电话:19850855600
手机:19850855600
邮箱:support@fwkbio.com
Φb×broth 培养基(1 L,pH 7.5)
Φb×broth 培养基(1 L,pH 7.5)
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | Φb×broth 培养基(Phage Broth) |
| 规格 | 1 L |
| pH | 7.5 |
| 保存条件 | 4 ℃密封保存 |
| 灭菌方式 | 高温高压灭菌(121 ℃,15~20 min) |
| 主要用途 | M13丝状噬菌体扩增、噬菌体展示文库制备 |
配方组成(1 L体系)
| 组分 | 用量 | 终浓度 | CAS号 |
|---|---|---|---|
| Tryptone(胰蛋白胨) | 20 g | 2%(W/V) | 91079-40-2 |
| Yeast Extract(酵母提取物) | 5 g | 0.5%(W/V) | 8013-01-2 |
| MgSO₄·7H₂O(七水合硫酸镁) | 5 g | 0.5%(W/V) | 10034-99-8 |
| 1N KOH | 适量 | 调pH至7.5 | 1310-58-3 |
| 去离子水 | 定容至1 L | — | — |
配制步骤
称取20 g Tryptone、5 g Yeast Extract、5 g MgSO₄·7H₂O,置于1 L烧杯中。
加入约800 mL去离子水,充分搅拌至完全溶解。
滴加1N KOH,调节pH至7.5(缓慢操作,充分混匀)。
加去离子水定容至1 L,充分混匀。
高温高压灭菌(121 ℃,15~20 min),冷却后4 ℃密封保存。
关键注意事项
⚠️ 试剂特性:Tryptone、Yeast Extract易吸潮结块;MgSO₄·7H₂O易风化(失去结晶水),称量后立即密封各试剂瓶,称量快速高效,确保用量精准。
⚠️ pH调节:使用1N KOH调节pH至7.5(非NaOH),需缓慢滴加并充分混匀,避免局部碱性过强。灭菌后pH轻微偏移(≤±0.1)不可二次调节,防止引入杂菌。
⚠️ 分装与保存:分装容器需耐高温高压且洁净无菌,灭菌前检查密封性;冷却时避免密封过紧,防止容器因负压变形。
Φb×broth vs 2×YT vs LB 对比
| 比较项 | LB培养基 | 2×YT培养基 | Φb×broth(本方案) |
|---|---|---|---|
| Tryptone | 1%(10 g/L) | 1.6%(16 g/L) | 2%(20 g/L) |
| Yeast Extract | 0.5%(5 g/L) | 1%(10 g/L) | 0.5%(5 g/L) |
| NaCl | 1%(10 g/L) | 0.5%(5 g/L) | 无 |
| Mg²⁺来源 | 无 | 无 | MgSO₄·7H₂O 0.5% |
| pH调节剂 | NaOH | NaOH | KOH |
| pH | 7.0 | 7.0 | 7.5 |
| 主要用途 | 常规培养 | M13扩增/大提 | M13丝状噬菌体扩增 |
💡 核心区别:Φb×broth用MgSO₄替代NaCl,并提供Mg²⁺离子。Mg²⁺稳定噬菌体颗粒结构,是M13丝状噬菌体高效扩增的关键。
使用指南——M13噬菌体扩增
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| ① | 接种含M13噬菌体的菌液至Φb×broth培养基(起始OD₆₀₀≈0.05~0.1) |
| ② | 37 ℃振荡培养6~8小时 |
| ③ | 离心去除菌体,上清含高滴度M13噬菌体颗粒 |
| ④ | PEG/NaCl沉淀纯化噬菌体 |
主要应用
M13丝状噬菌体扩增与制备(核心应用)
噬菌体展示文库扩增
噬菌体感染实验
噬菌体颗粒稳定性研究