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NZCYM 培养基(1 L,pH 7.0)
NZCYM 培养基(1 L,pH 7.0)
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | NZCYM 培养基 |
| 规格 | 1 L |
| pH | 7.0 |
| 保存条件 | 4 ℃密封保存 |
| 灭菌方式 | 高温高压灭菌(121 ℃,15~20 min) |
| 主要用途 | λ噬菌体扩增、核酸研究、噬菌体展示文库制备 |
配方组成(1 L体系)
| 组分 | 用量 | 终浓度 | CAS号 |
|---|---|---|---|
| Yeast Extract(酵母提取物) | 5 g | 0.5%(W/V) | 8013-01-2 |
| Casamino Acid(酪蛋白氨基酸) | 1 g | 0.1%(W/V) | 65072-00-6 |
| NZ胺(NZ Amine) | 10 g | 1%(W/V) | — |
| NaCl(氯化钠) | 5 g | 0.5%(W/V) | 7647-14-5 |
| MgSO₄·7H₂O(七水合硫酸镁) | 2 g | 0.2%(W/V) | 10034-99-8 |
| 5N NaOH | 约0.2 mL | 调pH至7.0 | 1310-73-2 |
| 去离子水 | 定容至1 L | — | — |
配制步骤
称取5 g Yeast Extract、1 g Casamino Acid、10 g NZ胺、5 g NaCl和2 g MgSO₄·7H₂O,置于1 L烧杯中。
加入约800 mL去离子水,充分搅拌至完全溶解。
滴加5N NaOH(约0.2 mL),调节pH至7.0(极缓慢滴加,持续搅拌)。
加去离子水定容至1 L,充分混匀。
高温高压灭菌(121 ℃,15~20 min),冷却后4 ℃密封保存。
关键注意事项
⚠️ 试剂特性:Yeast Extract易吸潮结块;Casamino Acid、NZ胺易吸潮且纯度敏感;MgSO₄·7H₂O易风化,称量后立即密封各试剂瓶,操作快速高效,确保用量精准。
⚠️ pH调节:使用5N NaOH(浓度较高),需极缓慢滴加并持续搅拌,避免局部碱性过强破坏成分。灭菌后pH轻微偏移(≤±0.1)不可二次调节,防止引入杂菌。
⚠️ 分装与保存:分装容器需耐高温高压、洁净无菌,灭菌前检查密封性;冷却时避免密封过紧,防止容器因负压变形。
主要应用
λ噬菌体扩增与制备(核心应用)
噬菌体展示文库扩增
核酸研究相关实验
噬菌体感染与转染实验
使用指南——λ噬菌体扩增
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| ① | 制备对数生长期的大肠杆菌宿主菌(如LE392、C600等) |
| ② | 感染λ噬菌体后,加入顶层琼脂铺板 |
| ③ | 37 ℃培养过夜,收获噬菌斑 |
| ④ | 洗脱扩增λ噬菌体颗粒 |