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2×YT 培养基（1 L，pH 7.0）
2×YT 培养基（1 L，pH 7.0）
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 2×YT 培养基（2倍浓度YT培养基） |
| 规格 | 1 L |
| pH | 7.0 |
| 保存条件 | 4 ℃密封保存（有效期≤7天） |
| 灭菌方式 | 高温高压灭菌（121 ℃，15～20 min） |
| 主要用途 | M13噬菌体扩增、质粒DNA大量提取、高密度细菌培养 |
配方组成（1 L体系）
| 组分 | 用量 | 终浓度 | CAS号 |
|---|---|---|---|
| Tryptone（胰蛋白胨） | 16 g | 1.6%（W/V） | 91079-40-2 |
| Yeast Extract（酵母提取物） | 10 g | 1%（W/V） | 8013-01-2 |
| NaCl（氯化钠） | 5 g | 0.5%（W/V） | 7647-14-5 |
| 5N NaOH | 约0.2 mL | 调pH至7.0 | 1310-73-2 |
| 去离子水 | 定容至1 L | — | — |
配制步骤
称取16 g Tryptone、10 g Yeast Extract、5 g NaCl，置于1 L烧杯中。
加入约800 mL去离子水，充分搅拌至完全溶解（避免局部过热）。
滴加5N NaOH（约0.2 mL），调节pH至7.0。
加去离子水定容至1 L，充分混匀。
高温高压灭菌（121 ℃，15～20 min），冷却后4 ℃密封保存。
关键注意事项
⚠️ 分装容器：需耐高温高压且洁净无菌，灭菌前检查密封性。
⚠️ 冷却负压控制：冷却过程中避免容器密封过紧，防止负压变形。
⚠️ 有效期：4 ℃密封保存有效期不超过7天，启用后需无菌取用。
⚠️ 污染判断：若出现浑浊、沉淀、异味等污染迹象，需立即弃用。
⚠️ 溶解均匀：搅拌溶解时避免局部过热，确保各成分均匀分散，定容后再次混匀，保障营养成分分布一致。
LB vs 2×YT vs TB 培养基对比
| 比较项 | LB培养基 | 2×YT培养基（本方案） | TB培养基 |
|---|---|---|---|
| Tryptone | 1%（10 g/L） | 1.6%（16 g/L） | 1.2%（12 g/L） |
| Yeast Extract | 0.5%（5 g/L） | 1%（10 g/L） | 2.4%（24 g/L） |
| NaCl | 1%（10 g/L） | 0.5%（5 g/L） | —（磷酸盐缓冲） |
| 碳源/缓冲 | 无 | 无 | Glycerol+磷酸盐 |
| 营养水平 | 基础 | 较高 | 高 |
| 菌体产量 | 中等（OD~2） | 较高（OD~3） | 高（OD 3～5） |
| 适用场景 | 常规培养 | M13噬菌体扩增、大提质粒 | 高密度蛋白表达 |
使用指南
| 应用 | 使用方式 |
|---|---|
| M13噬菌体扩增 | 接种含噬菌体的菌液，培养6～8小时（核心应用） |
| 质粒DNA大量提取 | 高密度培养获得更多菌体 |
| 高密度细菌培养 | 比LB产菌量更高，适合需要大量菌体的实验 |
主要应用
M13噬菌体扩增与制备（核心应用）
质粒DNA大量提取（大提质粒）
高密度细菌培养
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