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SOC 培养基(100 mL)

发布:2026-07-16 浏览:0次

SOC 培养基(100 mL)

基本属性

属性内容
产品名称SOC 培养基(Super Optimal Broth with Catabolite Repression)
规格100 mL
主要成分SOB培养基 + 20 mM 葡萄糖
保存条件4 ℃短期保存(葡萄糖加入后≤3天)
灭菌方式SOB基础培养基高温高压灭菌;葡萄糖溶液0.22 μm过滤除菌
主要用途转化后细菌复苏培养(提高转化效率)

配方组成(100 mL体系)

SOB基础培养基(灭菌后使用前加葡萄糖)

组分用量(100 mL)终浓度CAS号
Tryptone(胰蛋白胨)2 g2%(W/V)91079-40-2
Yeast Extract(酵母提取物)0.5 g0.5%(W/V)8013-01-2
NaCl(氯化钠)0.05 g0.05%(W/V)7647-14-5
KCl(氯化钾)0.0186 g2.5 mM7447-40-7
MgCl₂·6H₂O(使用前添加)0.203 g(或0.5 mL 2 M储备液)10 mM7791-18-6
葡萄糖(使用前添加)0.36 g(或2 mL 1 M储备液)20 mM50-99-7

💡 SOC = SOB + 葡萄糖:SOC培养基即SOB培养基在使用前加入无菌葡萄糖至终浓度20 mM

配制步骤

第一步:配制SOB基础培养基(100 mL)

  1. 称取2 g Tryptone0.5 g Yeast Extract0.05 g NaCl,置于200 mL烧杯中。

  2. 加入约80 mL去离子水,充分搅拌溶解。

  3. 称取0.0186 g KCl,加入烧杯中,搅拌均匀。

  4. 滴加5N NaOH调节pH至7.0

  5. 加去离子水定容至100 mL,充分混匀。

  6. 高温高压灭菌(121 ℃,15~20 min),冷却至室温备用。

第二步:配制葡萄糖储备液(需单独配制)

  1. 称取1.8 g葡萄糖,溶于约8 mL去离子水中,定容至10 mL(即1 M葡萄糖溶液)。

  2. 使用0.22 μm滤器过滤除菌严禁高压灭菌)。

第三步:添加MgCl₂和葡萄糖(使用前)

  1. 超净台内无菌操作,加入0.5 mL 2 M MgCl₂灭菌溶液(终浓度10 mM)。

  2. 加入2 mL 1 M葡萄糖过滤除菌溶液(终浓度20 mM)。

  3. 充分混匀后4 ℃短期保存(≤3天)。

关键注意事项

  • ⚠️ 葡萄糖不耐高温:葡萄糖溶液严禁高温高压灭菌,必须使用0.22 μm滤器过滤除菌

  • ⚠️ 葡萄糖防吸潮:葡萄糖易吸潮,称量后立即密封试剂瓶

  • ⚠️ 葡萄糖现配现用:葡萄糖溶液需现配现用4 ℃短期保存(不超过3天) ,若出现浑浊、结块需弃用。

  • ⚠️ 温度控制:SOB培养基需提前灭菌冷却至室温,再加入葡萄糖溶液,避免高温导致葡萄糖降解。

  • ⚠️ MgCl₂使用前添加:MgCl₂需在培养基使用前无菌添加严禁高温高压灭菌

  • ⚠️ 过滤前检查滤器完整性:过滤前核查0.22 μm滤器完整性,全程无菌操作。

SOB vs SOC 培养基对比

比较项SOB培养基SOC培养基(本方案)
基础营养Tryptone 2% + Yeast 0.5% + NaCl 0.05%同SOB
KCl2.5 mM2.5 mM
MgCl₂10 mM(使用前加)10 mM(使用前加)
葡萄糖20 mM(使用前加)
用途感受态制备转化后复苏培养

转化后复苏操作流程

步骤操作
热激/电击转化后,立即加入1 mL SOC培养基
37 ℃振荡复苏培养45~60分钟(转化效率最高)
取适量菌液涂布含抗生素的选择性平板

主要应用

  • 转化后细菌复苏培养核心应用

  • 提高质粒DNA转化效率(葡萄糖提供能量,促进抗性基因表达)

  • 感受态细胞活性恢复