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LB 培养基（1 L，pH 7.0）
LB 培养基（1 L，pH 7.0）
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | LB 培养基（Luria-Bertani Medium） |
| 规格 | 1 L |
| pH（灭菌前） | 7.0 |
| 保存条件 | 4 ℃密封保存（有效期≤7天） |
| 灭菌方式 | 高温高压灭菌（121 ℃，15～20 min） |
| 主要用途 | 大肠杆菌常规培养、感受态制备、质粒扩增 |
配方组成（1 L体系）
| 组分 | 用量 | 终浓度 | CAS号 |
|---|---|---|---|
| Tryptone（胰蛋白胨） | 10 g | 1%（W/V） | 91079-40-2 |
| Yeast Extract（酵母提取物） | 5 g | 0.5%（W/V） | 8013-01-2 |
| NaCl（氯化钠） | 10 g | 1%（W/V） | 7647-14-5 |
| 5N NaOH | 约0.2 mL | 调pH至7.0 | 1310-73-2 |
| 去离子水 | 定容至1 L | — | — |
配制步骤
称取10 g Tryptone、5 g Yeast Extract、10 g NaCl，置于1 L烧杯中。
加入约800 mL去离子水，充分搅拌至完全溶解。
滴加5N NaOH（约0.2 mL），调节pH至7.0（缓慢操作，避免过量）。
加去离子水定容至1 L，充分混匀。
高温高压灭菌（121 ℃，15～20 min）。
灭菌后4 ℃密封保存（有效期≤7天）。
关键注意事项
⚠️ 防吸潮：Tryptone与Yeast Extract易吸潮，称量后及时密封试剂瓶，防止吸潮结块影响溶解效率。
⚠️ pH调节需缓慢：避免NaOH过量导致pH骤升。灭菌后pH会轻微偏移（≤±0.1），不可二次调节。
⚠️ 冷却负压控制：灭菌后冷却过程中避免容器密封过紧，防止负压变形。
⚠️ 有效期：4 ℃保存有效期不超过7天，启用后需无菌操作。
灭菌后状态：灭菌前为浅黄色浑浊液体，灭菌后应为浅黄色透明液体（蛋白质和酵母提取物充分溶解）。
使用指南
| 应用 | 使用方式 |
|---|---|
| 大肠杆菌常规培养 | 直接接种，37 ℃振荡培养 |
| 感受态细胞制备 | 作为预培养和复苏培养基 |
| 质粒扩增 | 接种含抗生素的LB培养基 |
| LB平板制备 | 灭菌后冷却至50～55 ℃，加入抗生素倒平板 |
含抗生素LB平板的保存
| 抗生素 | 平板保存条件 | 有效期 |
|---|---|---|
| Ampicillin（100 μg/mL） | 4 ℃避光 | 2～4周 |
| Kanamycin（50 μg/mL） | 4 ℃ | 2～4周 |
| Chloramphenicol（34 μg/mL） | 4 ℃ | 2～4周 |
主要应用
大肠杆菌常规液体培养（核心应用）
LB琼脂平板制备（需添加1.5%琼脂粉）
感受态细胞制备（CaCl₂法/电转化法）
质粒DNA扩增与提取
重组蛋白表达预培养
