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X-Gal 溶液(20 mg/mL)(50 mL)
X-Gal 溶液(20 mg/mL)(50 mL)
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | X-Gal 溶液(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷) |
| 规格 | 50 mL |
| 浓度 | 20 mg/mL |
| 溶剂 | DMF(二甲基甲酰胺) |
| 保存条件 | -20 ℃避光密封保存(1 mL/份分装) |
| 主要用途 | 蓝白斑筛选显色底物(与IPTG配合使用) |
配方组成(50 mL体系)
| 组分 | 用量 | 终浓度 | CAS号 |
|---|---|---|---|
| X-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷) | 1 g | 20 mg/mL | 7240-90-6 |
| DMF(二甲基甲酰胺) | 定容至50 mL | — | 68-12-2 |
配制步骤
通风橱内操作,称取1 g X-Gal,置于50 mL离心管中。
加入约40 mL DMF(二甲基甲酰胺) ,充分混合至完全溶解。
用DMF定容至50 mL,轻轻颠倒混匀。
小份分装(推荐1 mL/份),于-20 ℃避光密封保存。
关键注意事项
⚠️ DMF毒性及挥发:DMF易挥发且具刺激性,全程在通风橱内操作,佩戴手套、护目镜和实验服。
⚠️ 全程避光:X-Gal对光极其敏感,称量、溶解、分装全程避光操作(关闭照明灯或使用棕色容器/铝箔包裹)。
⚠️ 避免反复冻融:反复冻融会导致X-Gal降解失效,1 mL/份小份分装、取用即弃。
溶剂选择:X-Gal不溶于水,必须使用DMF或DMSO作为溶剂。DMF溶解效果优于DMSO,是蓝白斑筛选的标准选择。
保存条件:-20 ℃密封避光保存,分装后每管标注“20 mg/mL X-Gal,-20℃”及配制日期。
使用指南——蓝白斑筛选
| 应用 | 用量(每1 L培养基) | 终浓度 |
|---|---|---|
| 蓝白斑筛选(+IPTG) | 2 mL(20 mg/mL储备液) | 40 μg/mL |
| 与IPTG配合使用 | IPTG 1 mL/L + X-Gal 2 mL/L | IPTG 24 μg/mL + X-Gal 40 μg/mL |
主要应用
蓝白斑筛选显色底物(与IPTG配合)(核心应用)
β-半乳糖苷酶活性检测(组织化学染色)
重组克隆筛选(lacZα互补系统