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X-Gal 溶液(20 mg/mL)(50 mL)

发布:2026-07-16 浏览:0次

X-Gal 溶液(20 mg/mL)(50 mL)

基本属性

属性内容
产品名称X-Gal 溶液(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)
规格50 mL
浓度20 mg/mL
溶剂DMF(二甲基甲酰胺)
保存条件-20 ℃避光密封保存(1 mL/份分装)
主要用途蓝白斑筛选显色底物(与IPTG配合使用)

配方组成(50 mL体系)

组分用量终浓度CAS号
X-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)1 g20 mg/mL7240-90-6
DMF(二甲基甲酰胺)定容至50 mL68-12-2

配制步骤

  1. 通风橱内操作,称取1 g X-Gal,置于50 mL离心管中。

  2. 加入约40 mL DMF(二甲基甲酰胺) ,充分混合至完全溶解。

  3. 用DMF定容至50 mL,轻轻颠倒混匀。

  4. 小份分装(推荐1 mL/份),于-20 ℃避光密封保存

关键注意事项

  • ⚠️ DMF毒性及挥发:DMF易挥发且具刺激性,全程在通风橱内操作佩戴手套、护目镜和实验服

  • ⚠️ 全程避光:X-Gal对光极其敏感,称量、溶解、分装全程避光操作(关闭照明灯或使用棕色容器/铝箔包裹)。

  • ⚠️ 避免反复冻融:反复冻融会导致X-Gal降解失效,1 mL/份小份分装、取用即弃

  • 溶剂选择:X-Gal不溶于水,必须使用DMF或DMSO作为溶剂。DMF溶解效果优于DMSO,是蓝白斑筛选的标准选择。

  • 保存条件:-20 ℃密封避光保存,分装后每管标注“20 mg/mL X-Gal,-20℃”及配制日期。

使用指南——蓝白斑筛选

应用用量(每1 L培养基)终浓度
蓝白斑筛选(+IPTG)2 mL(20 mg/mL储备液)40 μg/mL
与IPTG配合使用IPTG 1 mL/L + X-Gal 2 mL/LIPTG 24 μg/mL + X-Gal 40 μg/mL

主要应用

  • 蓝白斑筛选显色底物(与IPTG配合)(核心应用

  • β-半乳糖苷酶活性检测(组织化学染色)

  • 重组克隆筛选(lacZα互补系统