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10×TBST 缓冲液（1 L，pH 7.5–8.0）
10×TBST 缓冲液（1 L，pH 7.5–8.0）
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 10×TBST 缓冲液（含吐温-20） |
| 规格 | 1 L |
| pH（室温） | 7.5–8.0 |
| 保存条件 | 室温密封保存（灭菌后，3个月稳定） |
| 使用方式 | 使用时稀释10倍（如100 mL 10× + 900 mL dH₂O = 1 L 1×工作液） |
| 主要用途 | Western Blot 洗涤缓冲液、抗体稀释液 |
配方组成（1 L体系）
| 组分 | 用量 | 工作浓度（10×） | CAS号 |
|---|---|---|---|
| Tris 碱 | 121 g | 1 M | 77-86-1 |
| 硼酸 | 55 g | 1 M（Tris-硼酸） | 10043-35-3 |
| NaCl（氯化钠） | 87.66 g | 0.9 M | 7647-14-5 |
| Tween-20 | 10 mL | 1%（V/V） | 9005-64-5 |
| 去离子水 | 定容至1 L | — | — |
配制步骤
称取121 g Tris 碱、55 g 硼酸、87.66 g NaCl，置于1 L烧杯中。
加入约800 mL去离子水，充分搅拌至所有固体完全溶解。
加入10 mL Tween-20，继续搅拌10～15分钟，确保表面活性剂均匀分散。
在室温下用浓盐酸将溶液pH调至7.5–8.0。
转移至1 L容量瓶，用去离子水定容至刻度线，颠倒混匀数次。
高温高压灭菌（121 ℃，20 min），冷却后室温密封保存。
使用时稀释10倍（如取100 mL 10×TBST，加去离子水定容至1 L，即得1×TBST工作液）。
关键注意事项
⚠️ CAS号更正：原配方中NaCl的CAS号写为77647-14-5（不存在），正确CAS号应为7647-14-5。
Tween-20泡沫控制：Tween-20易产生泡沫，搅拌时转速不宜过快；若配制后出现少量泡沫，可静置片刻再定容。
pH精确校准：该缓冲液的pH会影响蛋白抗原-抗体结合效率，需严格校准至目标值（室温下测定）。
稳定性：母液室温可稳定保存3个月，若出现浑浊、异味，说明已污染，需重新配制。
Tris-硼酸体系说明：本配方使用Tris-硼酸替代传统的Tris-HCl缓冲体系，硼酸根离子可作为额外的缓冲对，增强pH稳定性，适用于特定Western Blot实验条件。
稀释使用指南
| 需要1×工作液体积 | 10×TBST用量 | 去离子水用量 | 用途 |
|---|---|---|---|
| 1 L | 100 mL | 900 mL | 洗涤/稀释液 |
| 500 mL | 50 mL | 450 mL | 洗涤/稀释液 |
| 200 mL | 20 mL | 180 mL | 小量使用 |
TBST vs PBST 对比
| 比较项 | TBST（本方案） | PBST |
|---|---|---|
| 缓冲体系 | Tris-硼酸 | 磷酸盐（PBS） |
| pH稳定性 | 优异（Tris+硼酸双重缓冲） | 良好（磷酸盐单一缓冲） |
| 适用场景 | Western Blot（经典TBST） | ELISA、IHC |
| 与膜兼容性 | NC膜、PVDF膜通用 | NC膜、PVDF膜通用 |
主要应用
Western Blot膜洗涤缓冲液（核心应用）
抗体稀释液（常与BSA/脱脂奶粉配合使用）
免疫检测中的通用洗涤液
