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10×PBST 缓冲液（1 L，pH 7.4）
10×PBST 缓冲液（1 L，pH 7.4）
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 10×PBST 缓冲液（含吐温-20） |
| 规格 | 1 L |
| pH（室温） | 7.4 |
| 保存条件 | 室温密封保存（灭菌后） |
| 使用方式 | 使用时稀释10倍（如100 mL 10× + 900 mL dH₂O = 1 L 1×工作液） |
| 主要用途 | ELISA/Western Blot 洗涤缓冲液、抗体稀释液 |
配方组成（1 L体系）
| 组分 | 用量 | 工作浓度（10×） | CAS号 |
|---|---|---|---|
| NaCl（氯化钠） | 80 g | 1.37 M | 7647-14-5 |
| KCl（氯化钾） | 2 g | 27 mM | 7447-40-7 |
| Na₂HPO₄（磷酸氢二钠，无水） | 14.4 g | 100 mM | 7558-79-4 |
| 或 Na₂HPO₄·12H₂O（十二水合物） | 29 g | 100 mM | *10039-32-4* |
| KH₂PO₄（磷酸二氢钾） | 2.4 g | 20 mM | 26399-70-2 |
| Tween-20 | 10 mL | 1%（V/V） | 9005-64-5 |
| 去离子水 | 定容至1 L | — | — |
配制步骤
称取80 g NaCl、2 g KCl、14.4 g Na₂HPO₄（或29 g Na₂HPO₄·12H₂O）、2.4 g KH₂PO₄，置于1 L烧杯中。
加入约800 mL去离子水，充分搅拌至完全溶解。
加入10 mL Tween-20，继续搅拌至充分混匀（Tween-20粘稠，需较长时间搅拌）。
用浓盐酸或10 M NaOH将溶液pH调至7.4（室温下测定）。
转移至1 L容量瓶，用去离子水定容至1 L，充分混匀。
高温高压灭菌（121 ℃，15～20 min），室温密封保存。
使用时稀释10倍（如取100 mL 10×PBST，加去离子水定容至1 L，即得1×PBST工作液）。
关键注意事项
Tween-20混匀要点：Tween-20为粘稠表面活性剂，加入后需充分搅拌至完全分散（溶液应清澈透明，无油状液滴漂浮）。可先在小体积水中预混Tween-20再定容。
室温调pH：pH值会影响实验结果，需在室温下精确调至7.4。PBST缓冲液具有温度依赖的pH变化，温度变化需注意。
灭菌条件：高温高压灭菌（121 ℃，15～20 min）。灭菌后若出现浑浊或污染，需重新配制。
稳定性：灭菌后的10×PBST母液在室温下可稳定保存数月。
磷酸盐形态确认：Na₂HPO₄有无水物（分子量142）和十二水合物（分子量358）两种形式，称量前务必核对试剂标签。
稀释使用指南
| 需要1×工作液体积 | 10×PBST用量 | 去离子水用量 | 用途 |
|---|---|---|---|
| 1 L | 100 mL | 900 mL | 洗涤/稀释液 |
| 500 mL | 50 mL | 450 mL | 洗涤/稀释液 |
| 100 mL | 10 mL | 90 mL | 小量使用 |
主要应用
ELISA洗涤缓冲液（核心应用）
Western Blot洗涤缓冲液（TBST替代品）
抗体稀释液（常与BSA/脱脂奶粉配合使用）
免疫组化（IHC）洗涤液
