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0.5 M 磷酸盐缓冲液（1 L，pH 7.2）
0.5 M 磷酸盐缓冲液（1 L，pH 7.2）
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 0.5 M 磷酸盐缓冲液 |
| 规格 | 1 L |
| pH（室温） | 7.2 |
| 保存条件 | 室温密封保存（灭菌后） |
| 灭菌方式 | 高温高压灭菌（121 ℃，15～20 min） |
| 主要用途 | 通用磷酸盐缓冲液储备液、ELISA/免疫检测缓冲液 |
配方组成（1 L体系）
| 组分 | 用量 | 终浓度 | CAS号 |
|---|---|---|---|
| Na₂HPO₄·7H₂O（磷酸氢二钠七水合物） | 134 g | 0.5 M | 7782-85-6 |
| 85% H₃PO₄（浓磷酸） | 适量 | 调pH至7.2 | 7664-38-2 |
| 去离子水 | 定容至1 L | — | — |
配制步骤
称取134 g Na₂HPO₄·7H₂O，置于1 L烧杯中。
加入约800 mL去离子水，充分搅拌至完全溶解。
在搅拌条件下逐滴加入85% H₃PO₄（浓磷酸） ，用pH计精确监测，调节pH至7.2。
用去离子水定容至1 L，充分混匀。
高温高压灭菌（121 ℃，15～20 min），冷却后室温密封保存。
关键注意事项
⚠️ 磷酸盐水合物确认：磷酸钠盐有多种水合物形式（无水、一水、七水、十二水等），称量前务必核对试剂瓶标签，否则浓度会有巨大偏差。本配方基于七水合物（Na₂HPO₄·7H₂O，分子量268.07） 。
⚠️ pH温度依赖性：磷酸盐缓冲液的pH值受温度影响较大（温度升高，pH下降）。建议在实验所需温度下调节pH，或统一在室温（25 ℃）下调节并记录温度。
浓磷酸腐蚀性：85% H₃PO₄具有腐蚀性，操作时佩戴耐化学品手套和护目镜，在通风橱内操作。
磷酸盐沉淀风险：高浓度磷酸盐缓冲液在低温下可能析出沉淀，若出现沉淀，可在37 ℃水浴加热溶解后使用。
磷酸氢二钠水合物对照表
| 水合物形式 | 分子量 | 0.5 M（1 L）称样量 | CAS号 |
|---|---|---|---|
| 七水合物（本方案） | 268.07 | 134 g | 7782-85-6 |
| 十二水合物 | 358.14 | 179 g | 10039-32-4 |
| 无水物 | 141.96 | 71 g | 7558-79-4 |
| 二水合物 | 177.99 | 89 g | 10028-24-7 |
⚠️ 称量前务必核对试剂瓶标签，确认水合物形式后方可称量。
稀释使用指南
| 工作浓度 | 0.5 M磷酸盐缓冲液用量 | 去离子水用量 | 典型应用 |
|---|---|---|---|
| 0.5 M | 无需稀释 | — | 储备液直接使用 |
| 0.1 M | 200 mL | 800 mL | 稀释后使用 |
| 50 mM | 100 mL | 900 mL | 常规缓冲液 |
| 10 mM | 20 mL | 980 mL | 低浓度缓冲液 |
主要应用
磷酸盐缓冲液储备液：稀释至工作浓度使用
ELISA包被/洗涤缓冲液基础组分
免疫检测通用缓冲液
蛋白质/抗体稀释液基础缓冲液
