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1.5 M Tris-HCl 缓冲液（1 L，pH 8.8）
1.5 M Tris-HCl 缓冲液（1 L，pH 8.8）
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 1.5 M Tris-HCl 缓冲液 |
| 规格 | 1 L |
| pH（室温） | 8.8 |
| 保存条件 | 室温密封保存（灭菌后） |
| 灭菌方式 | 高温高压灭菌（121 ℃，15～20 min） |
| 主要用途 | SDS-PAGE分离胶缓冲液 |
配方组成（1 L体系）
| 组分 | 用量 | 终浓度 | CAS号 |
|---|---|---|---|
| Tris 碱（三羟甲基氨基甲烷） | 181.7 g | 1.5 M | 77-86-1 |
| 浓盐酸（HCl） | 适量 | 调pH至8.8 | 7647-01-0 |
| 去离子水 | 定容至1 L | — | — |
配制步骤
称取181.7 g Tris 碱，置于1 L烧杯中。
加入约800 mL去离子水，充分搅拌至完全溶解。
待溶液冷却至室温后，在搅拌条件下逐滴加入浓盐酸，用pH计精确调节pH至8.8。
用去离子水定容至1 L，充分混匀。
高温高压灭菌（121 ℃，15～20 min）。
灭菌后冷却至室温，室温密封保存。
SDS-PAGE凝胶缓冲液对比
| 缓冲液 | 浓度 | pH | 用途 |
|---|---|---|---|
| 1.5 M Tris-HCl（本方案） | 1.5 M | 8.8 | 分离胶（下层胶）缓冲液 |
| 0.5 M Tris-HCl | 0.5 M | 6.8 | 浓缩胶（上层胶）缓冲液 |
| 1 M Tris-HCl | 1 M | 7.4/7.6/8.0 | 通用缓冲液储备液 |
关键注意事项
⚠️ 温度依赖的pH变化：Tris溶液的pH值随温度变化显著，温度每升高1℃，pH值约降低0.03个单位。配制时必须待溶液冷却至室温后再调节pH。
浓盐酸腐蚀性：浓盐酸具有强挥发性和腐蚀性，操作时必须在通风橱内进行，佩戴耐化学品手套和护目镜。
加酸顺序：量取浓盐酸时应缓慢加入Tris溶液中，边加边搅拌，避免局部过热。
配制量确认：本配方为1 L配制量，如需100 mL，所有用量按比例折算（Tris碱18.17 g，定容至100 mL）。
在SDS-PAGE中的使用（分离胶配制）
以配制10 mL 10%分离胶为例：
| 组分 | 用量 |
|---|---|
| 去离子水 | 4.0 mL |
| 1.5 M Tris-HCl（pH 8.8） | 2.5 mL |
| 10% SDS | 0.1 mL |
| 30%丙烯酰胺（29:1） | 3.3 mL |
| 10% APS | 0.1 mL |
| TEMED | 0.004 mL |
主要应用
SDS-PAGE分离胶（下层胶）缓冲液（核心应用）
Western Blot蛋白电泳凝胶配制
蛋白质分析相关实验
