产品快速导航
地址：深圳市龙岗区平湖街道禾花社区华南大道一号华南国际皮革皮具原辅料物流区二期3A-053
电话：19850855600
手机：19850855600
邮箱：support@fwkbio.com
电话：19850855600
手机：19850855600
邮箱：support@fwkbio.com
5×SDS-PAGE 上样缓冲液（5 mL，含β-巯基乙醇）
5×SDS-PAGE 上样缓冲液（5 mL，含β-巯基乙醇）
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 5×SDS-PAGE 上样缓冲液（含还原剂） |
| 规格 | 5 mL（不含β-ME）/ 5.25 mL（加入β-ME后） |
| pH | 6.8 |
| 保存条件 | 室温保存（加入β-ME后约1个月） |
| 使用方式 | 样品:缓冲液 = 4:1（最终1×） |
| 主要用途 | SDS-PAGE蛋白电泳样品变性处理 |
配方组成（5 mL体系）
| 组分 | 用量 | 工作浓度（5×） | CAS号 |
|---|---|---|---|
| 1 M Tris-HCl（pH 6.8） | 1.25 mL | 250 mM | 1185-53-1 |
| SDS（十二烷基硫酸钠） | 0.5 g | 10%（W/V） | 25155-30-0 |
| 溴酚蓝（BPB） | 25 mg | 0.5%（W/V） | 115-39-9 |
| 甘油（Glycerol） | 2.5 mL | 50%（V/V） | 56-81-5 |
| β-巯基乙醇（使用前加入） | 25 μL/份 | 5%（V/V） | 60-24-2 |
| 去离子水 | 定容至5 mL | — | — |
配制步骤
基础缓冲液配制：
量取1.25 mL 1 M Tris-HCl（pH 6.8） 、2.5 mL 甘油，称取0.5 g SDS、25 mg 溴酚蓝，置于10 mL塑料离心管中。
加去离子水溶解后定容至5 mL，充分混匀至所有固体完全溶解。
小份分装（推荐500 μL/份），室温保存。
使用前处理（每小份）：
取一小份（500 μL）基础缓冲液，加入25 μL β-巯基乙醇（2-ME），充分混匀。
加入β-ME后的上样缓冲液可在室温保存约1个月。
关键注意事项
β-巯基乙醇（2-ME）使用前加入：2-ME为还原剂，用于断裂蛋白质二硫键。应在使用前现加，不可预先加入全部储备液中长期保存（会逐渐氧化失效）。
⚠️ β-ME毒性：β-巯基乙醇有剧毒且伴有难闻恶臭，操作时必须在通风橱内进行，必须佩戴耐化学品手套。
颜色变化属正常：加入β-ME后，溶液颜色可能从深蓝色变为蓝绿色或黄色，这是正常的酸碱反应现象，不影响使用。
加热变性：蛋白样品与上样缓冲液混合后，通常需在95～100 ℃加热5～10分钟，使蛋白质充分变性。
室温保存：含SDS和甘油的上样缓冲液在室温下为液态，无需冷藏。
使用说明
| 样品体积 | 5×Loading Buffer用量 | 最终体积 | 稀释倍数 |
|---|---|---|---|
| 4 μL | 1 μL | 5 μL | 1× |
| 8 μL | 2 μL | 10 μL | 1× |
| 16 μL | 4 μL | 20 μL | 1× |
| 20 μL | 5 μL | 25 μL | 1× |
主要应用
SDS-PAGE蛋白电泳样品制备（核心应用）
Western Blot样品变性处理
还原型蛋白电泳
