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1 M Tris-HCl 缓冲液(1 L,pH 7.4 / 7.6 / 8.0)

发布:2026-07-16 浏览:0次

1 M Tris-HCl 缓冲液(1 L,pH 7.4 / 7.6 / 8.0)

基本属性

属性内容
产品名称1 M Tris-HCl 缓冲液
规格1 L
pH可选7.4 / 7.6 / 8.0(室温测定)
保存条件室温密封保存(灭菌后)
灭菌方式高温高压灭菌(121 ℃,15~20 min)
主要用途分子生物学通用缓冲液储备液

配方组成(1 L体系)

组分用量终浓度CAS号
Tris 碱(三羟甲基氨基甲烷)121.1 g1 M77-86-1
浓盐酸(HCl)按下表用量调pH7647-01-0
去离子水定容至1 L

pH调节参照表

目标pH(室温)浓HCl(12 N)加入量
7.4约70 mL
7.6约60 mL
8.0约42 mL

配制步骤

  1. 称取121.1 g Tris 碱,置于1 L烧杯中。

  2. 加入约800 mL去离子水,充分搅拌至完全溶解。

  3. 按上表用量,在搅拌条件下逐滴加入浓HCl,用pH计精确监测,调至目标pH值。

  4. 用去离子水定容至1 L,充分混匀。

  5. 高温高压灭菌(121 ℃,15~20 min)。

  6. 灭菌后冷却至室温,室温密封保存

关键注意事项

  • ⚠️ 温度依赖的pH变化:Tris溶液的pH值随温度变化显著,温度每升高1 ℃,pH值约降低0.03个单位。配制时必须待溶液冷却至室温后再调节pH,否则实际使用温度下的pH会偏离目标值。

  • 浓盐酸腐蚀性:浓盐酸具有强挥发性和腐蚀性,操作时必须在通风橱内进行佩戴耐化学品手套和护目镜

  • 加酸顺序:量取浓盐酸时应缓慢加入Tris溶液中,边加边搅拌,避免局部过热。

  • 三种pH独立配制:pH 7.4、7.6、8.0为三种独立产品,配制时按目标pH选择对应的盐酸用量。

常见工作浓度稀释

工作浓度1 M Tris-HCl用量去离子水用量典型应用
1 M无需稀释储备液直接使用
0.5 M500 mL500 mL蛋白质/核酸实验中高浓度缓冲
0.1 M100 mL900 mL多数生化实验常用浓度
10 mM10 mL990 mL核酸溶解/稀释缓冲液

主要应用

  • TE缓冲液配制:与EDTA混合制备TE缓冲液

  • TBS缓冲液配制:与NaCl混合制备Tris缓冲盐水

  • 核酸/蛋白质实验:广泛用作pH缓冲体系的基础储备液