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1 M Tris-HCl 缓冲液(1 L,pH 7.4 / 7.6 / 8.0)
1 M Tris-HCl 缓冲液(1 L,pH 7.4 / 7.6 / 8.0)
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 1 M Tris-HCl 缓冲液 |
| 规格 | 1 L |
| pH可选 | 7.4 / 7.6 / 8.0(室温测定) |
| 保存条件 | 室温密封保存(灭菌后) |
| 灭菌方式 | 高温高压灭菌(121 ℃,15~20 min) |
| 主要用途 | 分子生物学通用缓冲液储备液 |
配方组成(1 L体系)
| 组分 | 用量 | 终浓度 | CAS号 |
|---|---|---|---|
| Tris 碱(三羟甲基氨基甲烷) | 121.1 g | 1 M | 77-86-1 |
| 浓盐酸(HCl) | 按下表用量 | 调pH | 7647-01-0 |
| 去离子水 | 定容至1 L | — | — |
pH调节参照表
| 目标pH(室温) | 浓HCl(12 N)加入量 |
|---|---|
| 7.4 | 约70 mL |
| 7.6 | 约60 mL |
| 8.0 | 约42 mL |
配制步骤
称取121.1 g Tris 碱,置于1 L烧杯中。
加入约800 mL去离子水,充分搅拌至完全溶解。
按上表用量,在搅拌条件下逐滴加入浓HCl,用pH计精确监测,调至目标pH值。
用去离子水定容至1 L,充分混匀。
高温高压灭菌(121 ℃,15~20 min)。
灭菌后冷却至室温,室温密封保存。
关键注意事项
⚠️ 温度依赖的pH变化:Tris溶液的pH值随温度变化显著,温度每升高1 ℃,pH值约降低0.03个单位。配制时必须待溶液冷却至室温后再调节pH,否则实际使用温度下的pH会偏离目标值。
浓盐酸腐蚀性:浓盐酸具有强挥发性和腐蚀性,操作时必须在通风橱内进行,佩戴耐化学品手套和护目镜。
加酸顺序:量取浓盐酸时应缓慢加入Tris溶液中,边加边搅拌,避免局部过热。
三种pH独立配制:pH 7.4、7.6、8.0为三种独立产品,配制时按目标pH选择对应的盐酸用量。
常见工作浓度稀释
| 工作浓度 | 1 M Tris-HCl用量 | 去离子水用量 | 典型应用 |
|---|---|---|---|
| 1 M | 无需稀释 | — | 储备液直接使用 |
| 0.5 M | 500 mL | 500 mL | 蛋白质/核酸实验中高浓度缓冲 |
| 0.1 M | 100 mL | 900 mL | 多数生化实验常用浓度 |
| 10 mM | 10 mL | 990 mL | 核酸溶解/稀释缓冲液 |
主要应用
TE缓冲液配制:与EDTA混合制备TE缓冲液
TBS缓冲液配制:与NaCl混合制备Tris缓冲盐水
核酸/蛋白质实验:广泛用作pH缓冲体系的基础储备液