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40%(W/V)丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺溶液(19:1)(1 L)

发布:2026-07-16 浏览:0次

40%(W/V)丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺溶液(19:1)(1 L)

基本属性

属性内容
产品名称40%(W/V)丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺溶液(19:1)
规格1 L
总浓度40%(W/V)
交联度(Acrylamide:BIS)19:1
pH5.0~6.5(未调节)
保存条件4 ℃避光保存(棕色瓶),不可冷冻
灭菌方式0.45 μm 滤器过滤(不可高压灭菌)
主要用途DNA/RNA PAGE、小分子蛋白分离

配方组成(1 L体系)

组分用量终浓度CAS号
丙烯酰胺(Acrylamide)380 g38%(W/V)79-06-1
甲叉双丙烯酰胺(BIS)20 g2%(W/V)110-26-9
去离子水定容至1 L

配制步骤

  1. 称取380 g 丙烯酰胺(Acrylamide)20 g 甲叉双丙烯酰胺(BIS) ,置于1 L烧杯中。

  2. 加入约600 mL去离子水,充分搅拌至完全溶解。

  3. 用去离子水定容至1 L,充分混匀。

  4. 使用0.45 μm滤器过滤除去不溶性杂质。

  5. 转移至棕色瓶中4 ℃避光保存

19:1 vs 29:1 交联度选择指南

交联度(Acrylamide:BIS)凝胶孔径推荐应用
19:1(本方案)较小,更致密DNA/RNA PAGE、小分子蛋白(<10 kDa)、测序胶
29:1(标准蛋白胶)较大,较疏松常规SDS-PAGE蛋白电泳(10~200 kDa)
37.5:1最大,最疏松超大分子蛋白电泳、某些特殊应用

💡 选择建议19:1交联度产生的凝胶孔径更小,是DNA PAGE和寡核苷酸分离的首选,也适用于小分子量蛋白(<10 kDa)的Tricine-SDS-PAGE

关键注意事项

  • ⚠️ 神经毒性警示:丙烯酰胺为神经毒物,可通过皮肤吸收,毒性具有积累性。配制时必须佩戴手套、护目镜,在通风橱内操作。

  • 避光保存:丙烯酰胺见光分解,必须使用棕色瓶保存。

  • 不可冷冻:冷冻导致单体析出结晶,不可冷冻保存

  • 过滤除杂:使用0.45 μm滤器过滤,去除未溶解颗粒和杂质。

  • 不可高压灭菌:高温导致丙烯酰胺聚合,严禁高压灭菌

凝胶配制参考(DNA PAGE)

凝胶浓度40%丙烯酰胺用量(10 mL体系)适用DNA大小范围
6%1.5 mL100 bp~1 kb
8%2.0 mL50~600 bp
10%2.5 mL20~400 bp
12%3.0 mL10~300 bp

主要应用

  • DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) :小片段DNA/寡核苷酸高分辨率分离(核心应用

  • RNA PAGE:小RNA、miRNA分析

  • Tricine-SDS-PAGE:小分子量蛋白(<10 kDa)分离