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30%(W/V)丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺溶液(29:1)(约1 L)
30%(W/V)丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺溶液(29:1)(约1 L)
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 30%(W/V)丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺溶液(29:1) |
| 规格 | 约1 L |
| 总浓度 | 30%(W/V) |
| 交联度(Acrylamide:BIS) | 29:1 |
| pH | 5.0~6.5(未调节) |
| 保存条件 | 4 ℃避光保存(棕色瓶),不可冷冻 |
| 灭菌方式 | 0.45 μm 滤器过滤(不可高压灭菌) |
| 主要用途 | SDS-PAGE蛋白电泳凝胶配制 |
配方组成(约1 L体系)
| 组分 | 用量 | 终浓度 | CAS号 |
|---|---|---|---|
| 丙烯酰胺(Acrylamide) | 290 g | 29%(W/V) | 79-06-1 |
| 甲叉双丙烯酰胺(BIS) | 10 g | 1%(W/V) | 110-26-9 |
| 去离子水 | 定容至约1 L | — | — |
配制步骤
称取290 g 丙烯酰胺(Acrylamide) 和10 g 甲叉双丙烯酰胺(BIS) ,置于1 L烧杯中。
加入约600 mL去离子水,充分搅拌至完全溶解。
用去离子水定容至约1 L,充分混匀。
使用0.45 μm滤器过滤除去不溶性杂质。
转移至棕色瓶中,4 ℃避光保存。
关键注意事项
⚠️ 神经毒性警示:丙烯酰胺为神经毒物,可通过皮肤吸收,其毒性作用具有积累性。配制时必须佩戴耐化学品手套、护目镜和实验服,在通风橱内操作。聚丙烯酰胺(聚合后)无毒,但仍需谨慎操作,因可能含有少量未聚合单体。
避光保存:丙烯酰胺见光会缓慢分解,必须使用棕色瓶保存,或使用透明瓶外包铝箔纸。
不可冷冻:丙烯酰胺溶液冷冻会导致单体析出结晶,不可冷冻保存。
过滤除杂:使用0.45 μm滤器过滤,去除未溶解颗粒和杂质。
不可高压灭菌:丙烯酰胺单体受热会聚合,严禁高压灭菌。
pH检测(可选) :高质量丙烯酰胺溶液的pH应在5.0~6.5之间。若pH显著偏离,可能影响凝胶聚合速率。
凝胶配制参考(不同浓度分离胶)
| 分离胶浓度 | 30%丙烯酰胺用量(10 mL体系) | 适用蛋白分子量范围 |
|---|---|---|
| 8% | 2.7 mL | 50~200 kDa |
| 10% | 3.3 mL | 20~120 kDa |
| 12% | 4.0 mL | 10~60 kDa |
| 15% | 5.0 mL | 5~40 kDa |
主要应用
SDS-PAGE蛋白电泳:配制分离胶和浓缩胶(核心应用)
非变性PAGE:天然蛋白电泳
核酸PAGE:小片段DNA/RNA分离