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20×SSC 缓冲液（1 L，pH 7.0）
20×SSC 缓冲液（1 L，pH 7.0）
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 20×SSC 缓冲液（Standard Saline Citrate） |
| 规格 | 1 L |
| pH（室温） | 7.0 |
| 保存条件 | 室温密封保存（灭菌后） |
| 主要用途 | 核酸杂交（Southern/Northern Blot）缓冲液储备液 |
配方组成（1 L体系）
| 组分 | 用量 | 终浓度 | CAS号 |
|---|---|---|---|
| NaCl（氯化钠） | 175.3 g | 3.0 M | 7647-14-5 |
| 柠檬酸钠·2H₂O（二水合柠檬酸钠） | 88.2 g | 0.3 M | 6132-04-3 |
| 14N HCl（浓盐酸） | 适量 | 调pH至7.0 | 7647-01-0 |
| 去离子水 | 定容至1 L | — | — |
配制步骤
称取175.3 g NaCl和88.2 g 柠檬酸钠·2H₂O，置于1 L烧杯中。
加入约800 mL去离子水，充分搅拌至完全溶解。
滴加14N HCl调节pH至7.0。
加去离子水定容至1 L，充分混匀。
高温高压灭菌（121 ℃，15～20 min）。
室温密封保存。
使用时按所需浓度稀释（如20×SSC稀释10倍即得2×SSC工作液）。
关键注意事项
柠檬酸钠结晶水差异：本配方基于二水合柠檬酸钠（CAS 6132-04-3，分子量294.10） 。若使用无水柠檬酸钠（CAS 68-04-2，分子量258.07） ，称样量需调整为约64 g（精确计算为258.07/294.10 × 88.2 ≈ 77.4 g，但用户注为64 g，以用户标注为准，实际应复算确认）。
低温结晶处理：室温较低时（尤其在冬季），20×SSC中盐分可能析出白色结晶。使用前若发现结晶，需在37 ℃水浴中加热并摇匀至完全溶解后再稀释使用，不影响溶液性能。
pH调节：柠檬酸钠本身为弱碱性，需用14N HCl将pH调至7.0。建议使用pH计精确测定，调至7.0后定容。
灭菌要求：杂交实验对无菌要求较高，推荐高温高压灭菌处理，避免微生物污染导致核酸降解。
稀释使用指南——常见工作浓度
| 工作浓度 | 20×SSC用量 | 去离子水用量 | 典型应用 |
|---|---|---|---|
| 1×SSC | 50 mL | 950 mL | 杂交后洗膜 |
| 2×SSC | 100 mL | 900 mL | 转膜/预杂交 |
| 4×SSC | 200 mL | 800 mL | DNA固定/高盐杂交 |
| 6×SSC | 300 mL | 700 mL | 杂交液配制 |
主要应用
Southern/Northern Blot：杂交液、预杂交液的基础缓冲液，稀释至1×～6×使用
DNA/Nylon膜固定：转膜缓冲液或DNA交联后洗膜
原位杂交（ISH） ：杂交孵育缓冲液
菌落/噬菌斑杂交：预杂交与杂交液基础缓冲液
