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DNA 变性缓冲液(1 L,1.5 M NaCl / 0.5 M NaOH)
DNA 变性缓冲液(1 L,1.5 M NaCl / 0.5 M NaOH)
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | DNA 变性缓冲液 |
| 规格 | 1 L |
| 主要成分 | 1.5 M NaCl + 0.5 M NaOH |
| 保存条件 | 室温密封保存(建议现配现用) |
| 核心应用 | Southern Blot中凝胶DNA变性处理 |
配方组成(1 L体系)
| 组分 | 用量 | 终浓度 | CAS号 |
|---|---|---|---|
| NaCl(氯化钠) | 87.7 g | 1.5 M | 7647-14-5 |
| NaOH(氢氧化钠) | 20 g | 0.5 M | 1310-73-2 |
| 去离子水 | 定容至1 L | — | — |
配制步骤
称取87.7 g NaCl和20 g NaOH,置于1 L烧杯中。
加入约800 mL去离子水,充分搅拌至完全溶解(NaOH溶解为放热反应,溶液会升温,属正常现象)。
待溶液冷却至室温后,用去离子水定容至1 L,充分混匀。
室温密封保存。
关键注意事项
安全防护:NaOH具有强腐蚀性,配制时必须佩戴耐化学品手套和护目镜。若不慎溅入眼睛或接触皮肤,立即用大量清水冲洗至少15分钟并就医。
建议现配现用:NaOH为强碱,长期放置会吸收空气中的CO₂生成碳酸钠,导致pH值下降,变性效率降低。建议在实验前新鲜配制,不宜长期储存。
放热反应:NaOH溶解过程剧烈放热,配制时应缓慢加入并持续搅拌,待溶液冷却至室温后再定容(高温时体积膨胀,热态定容会导致冷却后浓度偏高)。
配制容器:建议使用塑料烧杯(如PP材质)进行溶解操作,以防玻璃烧杯因局部过热而炸裂。
主要应用
Southern Blot DNA变性:琼脂糖凝胶电泳后,将凝胶中的双链DNA变性为单链,以便后续转膜和杂交。
膜上DNA变性固定:配合中和缓冲液使用,完成DNA从凝胶到膜的转移前处理。
核酸杂交前处理:使靶DNA充分暴露单链区域,便于探针结合