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DNA 变性缓冲液(1 L,1.5 M NaCl / 0.5 M NaOH)

发布:2026-07-16 浏览:0次

DNA 变性缓冲液(1 L,1.5 M NaCl / 0.5 M NaOH)

基本属性

属性内容
产品名称DNA 变性缓冲液
规格1 L
主要成分1.5 M NaCl + 0.5 M NaOH
保存条件室温密封保存(建议现配现用)
核心应用Southern Blot中凝胶DNA变性处理

配方组成(1 L体系)

组分用量终浓度CAS号
NaCl(氯化钠)87.7 g1.5 M7647-14-5
NaOH(氢氧化钠)20 g0.5 M1310-73-2
去离子水定容至1 L

配制步骤

  1. 称取87.7 g NaCl20 g NaOH,置于1 L烧杯中。

  2. 加入约800 mL去离子水,充分搅拌至完全溶解(NaOH溶解为放热反应,溶液会升温,属正常现象)。

  3. 待溶液冷却至室温后,用去离子水定容至1 L,充分混匀。

  4. 室温密封保存

关键注意事项

  • 安全防护:NaOH具有强腐蚀性,配制时必须佩戴耐化学品手套和护目镜。若不慎溅入眼睛或接触皮肤,立即用大量清水冲洗至少15分钟并就医。

  • 建议现配现用:NaOH为强碱,长期放置会吸收空气中的CO₂生成碳酸钠,导致pH值下降,变性效率降低。建议在实验前新鲜配制,不宜长期储存。

  • 放热反应:NaOH溶解过程剧烈放热,配制时应缓慢加入并持续搅拌,待溶液冷却至室温后再定容(高温时体积膨胀,热态定容会导致冷却后浓度偏高)。

  • 配制容器:建议使用塑料烧杯(如PP材质)进行溶解操作,以防玻璃烧杯因局部过热而炸裂。

主要应用

  • Southern Blot DNA变性:琼脂糖凝胶电泳后,将凝胶中的双链DNA变性为单链,以便后续转膜和杂交。

  • 膜上DNA变性固定:配合中和缓冲液使用,完成DNA从凝胶到膜的转移前处理。

  • 核酸杂交前处理:使靶DNA充分暴露单链区域,便于探针结合