产品快速导航
地址:深圳市龙岗区平湖街道禾花社区华南大道一号华南国际皮革皮具原辅料物流区二期3A-053
电话:19850855600
手机:19850855600
邮箱:support@fwkbio.com
电话:19850855600
手机:19850855600
邮箱:support@fwkbio.com
10×Loading Buffer(RNA电泳上样缓冲液)(10 mL)
10×Loading Buffer(RNA电泳上样缓冲液)(10 mL)
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 10×Loading Buffer(10倍浓缩RNA电泳上样缓冲液) |
| 规格 | 10 mL |
| 保存条件 | 室温密封保存 |
| 配制用水 | DEPC处理水(无RNase) |
| 使用方式 | 上样前按适当比例与RNA样品混合(使染料终浓度为1×) |
配方组成(10 mL体系)
| 组分 | 用量 | 工作浓度(10×) | CAS号 |
|---|---|---|---|
| 0.5M EDTA(pH 8.0)(DEPC处理) | 200 μL | 10 mM | 60-00-4 |
| 溴酚蓝(Bromophenol Blue) | 25 mg | 0.25%(W/V) | 115-39-9 |
| 二甲苯青FF(Xylene Cyanol FF) | 25 mg | 0.25%(W/V) | 2650-17-1 |
| 甘油(Glycerol) | 5 mL | 50%(V/V) | 56-81-5 |
| DEPC处理水 | 定容至10 mL | — | — |
与6×Loading Buffer配方对比
| 比较项 | 6×Loading Buffer | 10×Loading Buffer |
|---|---|---|
| 主要用途 | DNA/通用核酸电泳 | RNA电泳专用 |
| 配制用水 | 去离子水 | DEPC处理水 |
| EDTA浓度 | 30 mM | 10 mM |
| 甘油浓度 | 36% | 50% |
| 溴酚蓝浓度 | 0.05% | 0.25% |
| 二甲苯青FF浓度 | 0.05% | 0.25% |
| RNase控制 | 无特殊要求 | 严格无RNase |
配制步骤
取一支10 mL离心管(无RNase),加入200 μL 0.5M EDTA(pH 8.0)(DEPC处理) 。
称取25 mg 溴酚蓝和25 mg 二甲苯青FF,加入离心管中。
加入约4 mL DEPC处理水,充分搅拌或涡旋至染料完全溶解。
加入5 mL 甘油,充分混匀。
用DEPC处理水定容至10 mL。
室温保存。
关键注意事项
RNA专用:本品专为RNA电泳设计,染料浓度较高(0.25%),在RNA电泳中迁移位置清晰可见。
DEPC水全程使用:所有配制用水及储备液均须使用DEPC处理水,确保无RNase。
无RNase操作:所有接触溶液的工具(离心管、枪头、移液器)均须为无RNase级,操作时佩戴手套,避免RNase污染。
1×工作液染料迁移参照(RNA甲醛变性胶) :
溴酚蓝:约相当于300 nt RNA
二甲苯青FF:约相当于1,000 nt RNA
10×含义:使用时需稀释至1×工作浓度,确保染料指示准确。
主要应用
RNA甲醛变性琼脂糖凝胶电泳:RNA样品上样前的密度调节与位置指示。
RNA完整性检测:配合MOPS缓冲液,用于RNA质量评估