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6×Loading Buffer（核酸电泳上样缓冲液）（500 mL，pH 7.0）
6×Loading Buffer（核酸电泳上样缓冲液）（500 mL，pH 7.0）
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 6×Loading Buffer（6倍浓缩核酸电泳上样缓冲液） |
| 规格 | 500 mL |
| pH（室温） | 7.0 |
| 保存条件 | 室温密封保存 |
| 使用方式 | 上样前按1:5比例与样品混合（样品:缓冲液 = 5:1） |
配方组成（500 mL体系）
| 组分 | 用量 | 工作浓度（6×） | CAS号 |
|---|---|---|---|
| Na₂EDTA·2H₂O | 4.4 g | 30 mM | 6381-92-6 |
| 甘油（Glycerol） | 180 mL | 36%（V/V） | 56-81-5 |
| 溴酚蓝（Bromophenol Blue） | 250 mg | 0.05%（W/V） | 115-39-9 |
| 二甲苯青FF（Xylene Cyanol FF） | 250 mg | 0.05%（W/V） | 2650-17-1 |
| 2N NaOH | 适量 | 调pH至7.0 | 1310-73-2 |
| 去离子水 | 定容至500 mL | — | — |
配制步骤
准确称取4.4 g Na₂EDTA·2H₂O、250 mg 溴酚蓝、250 mg 二甲苯青FF，置于500 mL烧杯中。
加入约200 mL去离子水，加热并搅拌，使所有试剂充分溶解。
加入180 mL甘油，搅拌均匀。
用2N NaOH调节pH至7.0。
用去离子水定容至500 mL，充分混匀。
室温密封保存。
关键注意事项
染料迁移速率参照：
溴酚蓝在1×TAE中约相当于300 bp DNA片段的迁移速率；在1×TBE中约相当于200 bp。
二甲苯青FF在1×TAE中约相当于4,000 bp DNA片段的迁移速率；在1×TBE中约相当于2,000 bp。
电泳时可通过观察两种染料的迁移位置，大致判断核酸片段的分离进程。
甘油结晶处理：若甘油或蔗糖出现结晶沉淀，于37 ℃水浴加热溶解后即可正常使用，不影响性能。
EDTA作用：螯合金属离子，抑制电泳过程中金属离子依赖的核酸酶活性，保护样品完整性。
使用方式：上样前按1:5比例（样品:缓冲液 = 5:1）与样品混合，充分混匀后上样。
6×含义：使用时稀释6倍，即1体积缓冲液 + 5体积样品，最终为1×工作浓度。
主要应用
琼脂糖凝胶电泳上样：DNA/RNA样品电泳前的密度调节与位置指示。
聚丙烯酰胺凝胶电泳上样：PAGE样品的示踪染色
