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10×MOPS 缓冲液(1 L,pH 7.0)
10×MOPS 缓冲液(1 L,pH 7.0)
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 10×MOPS 缓冲液 |
| 规格 | 1 L |
| pH(室温) | 7.0 |
| 保存条件 | 室温避光保存(建议棕色瓶) |
| 灭菌方式 | 0.45 μm 滤膜过滤除菌(不可高压灭菌) |
| 配制用水 | DEPC 处理水 |
配方组成(1 L体系)
| 组分 | 用量 | 工作浓度(10×) | CAS号 |
|---|---|---|---|
| MOPS | 41.8 g | 200 mM | 1132-61-2 |
| 1M NaOAc(DEPC处理) | 20 mL | 20 mM | 127-09-3 |
| 0.5M EDTA(pH 8.0)(DEPC处理) | 20 mL | 10 mM | 60-00-4 |
| 2N NaOH | 适量 | 调pH至7.0 | 1310-73-2 |
| DEPC处理水 | 定容至1 L | — | — |
配制步骤
称取41.8 g MOPS,置于1 L烧杯中。
加入约700 mL DEPC处理水,搅拌至完全溶解。
使用2N NaOH调节pH至7.0。
加入20 mL 1M NaOAc(DEPC处理) 和20 mL 0.5M EDTA(pH 8.0)(DEPC处理) ,充分混匀。
用DEPC处理水定容至1 L。
使用0.45 μm滤膜过滤除菌。
转移至棕色瓶中,室温避光保存。
关键注意事项
光敏感性:MOPS对光敏感,长期光照会分解变黄,必须使用棕色瓶或避光保存。
变质判断:若溶液变为深黄色或棕色,说明MOPS已降解,不可使用,需重新配制。
DEPC水全程使用:所有配制用水及储备液稀释用水均须使用DEPC处理水(RNA电泳专用,灭活RNase)。
不可高压灭菌:MOPS溶液受热可能分解,采用0.45 μm滤膜过滤除菌,不可高温高压灭菌。
pH调节:使用2N NaOH调pH至7.0,pH对电泳分辨率有直接影响,须精确控制。
主要应用
RNA甲醛变性琼脂糖凝胶电泳:RNA完整性检测(如真核生物28S/18S rRNA质量评估)的标准缓冲液。
Northern Blot:RNA转移与固定前的电泳分离。
RNA样品质量分析:评估RNA降解程度和纯度