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10×MOPS 缓冲液(1 L,pH 7.0)

发布:2026-07-16 浏览:0次

10×MOPS 缓冲液(1 L,pH 7.0)

基本属性

属性内容
产品名称10×MOPS 缓冲液
规格1 L
pH(室温)7.0
保存条件室温避光保存(建议棕色瓶)
灭菌方式0.45 μm 滤膜过滤除菌(不可高压灭菌)
配制用水DEPC 处理水

配方组成(1 L体系)

组分用量工作浓度(10×)CAS号
MOPS41.8 g200 mM1132-61-2
1M NaOAc(DEPC处理)20 mL20 mM127-09-3
0.5M EDTA(pH 8.0)(DEPC处理)20 mL10 mM60-00-4
2N NaOH适量调pH至7.01310-73-2
DEPC处理水定容至1 L

配制步骤

  1. 称取41.8 g MOPS,置于1 L烧杯中。

  2. 加入约700 mL DEPC处理水,搅拌至完全溶解。

  3. 使用2N NaOH调节pH至7.0

  4. 加入20 mL 1M NaOAc(DEPC处理)20 mL 0.5M EDTA(pH 8.0)(DEPC处理) ,充分混匀。

  5. DEPC处理水定容至1 L。

  6. 使用0.45 μm滤膜过滤除菌。

  7. 转移至棕色瓶中,室温避光保存

关键注意事项

  • 光敏感性:MOPS对光敏感,长期光照会分解变黄,必须使用棕色瓶或避光保存

  • 变质判断:若溶液变为深黄色或棕色,说明MOPS已降解,不可使用,需重新配制。

  • DEPC水全程使用:所有配制用水及储备液稀释用水均须使用DEPC处理水(RNA电泳专用,灭活RNase)。

  • 不可高压灭菌:MOPS溶液受热可能分解,采用0.45 μm滤膜过滤除菌,不可高温高压灭菌。

  • pH调节:使用2N NaOH调pH至7.0,pH对电泳分辨率有直接影响,须精确控制。

主要应用

  • RNA甲醛变性琼脂糖凝胶电泳:RNA完整性检测(如真核生物28S/18S rRNA质量评估)的标准缓冲液

  • Northern Blot:RNA转移与固定前的电泳分离。

  • RNA样品质量分析:评估RNA降解程度和纯度