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50×TAE 缓冲液(1 L,pH 8.3)

发布:2026-07-16 浏览:0次

50×TAE 缓冲液(1 L,pH 8.3)

基本属性

属性内容
产品名称50×TAE 缓冲液(50倍浓缩Tris-醋酸-EDTA电泳缓冲液)
规格1 L
pH(室温)8.3
保存条件室温密封保存(无需高压灭菌)
使用方式使用时稀释50倍(如取20 mL定容至1 L,即得1×TAE工作液)

配方组成(1 L体系)

组分用量工作浓度(50×)CAS号
Tris 碱242 g2 M77-86-1
冰乙酸(CH₃COOH)57.1 mL64-19-7
Na₂-EDTA·2H₂O37.2 g100 mM6381-92-6
去离子水定容至1 L

配制步骤

  1. 称取242 g Tris 碱、量取57.1 mL 冰乙酸、称取37.2 g Na₂-EDTA·2H₂O,置于1 L烧杯中。

  2. 加入约800 mL 去离子水,充分搅拌至完全溶解。

  3. 冰乙酸Tris 碱将溶液pH调至8.3室温下测定)。

  4. 将溶液转移至1 L容量瓶,用去离子水定容至1 L,充分混匀。

  5. 室温保存无需高压灭菌

关键注意事项

  • pH温度依赖性:TAE缓冲液的pH会随温度变化,必须在室温下测定pH,不可在加热或低温状态下调节。

  • EDTA溶解要点:Na₂-EDTA·2H₂O在中性或碱性条件下溶解度更高。若溶解困难,可滴加少量NaOH溶液助溶,不影响最终配方。

  • 无需灭菌:TAE缓冲液为电泳用缓冲液,无需高压灭菌。使用去离子水配制并在洁净条件下操作即可。

  • 沉淀复溶:50×母液长期储存可能产生沉淀,若出现沉淀,37 ℃水浴加热溶解后即可正常使用,不影响电泳效果。

  • 稀释使用:使用时按50倍稀释(如取20 mL 50×TAE加去离子水定容至1 L,即得1×TAE工作液)。

主要应用

  • 琼脂糖凝胶电泳:作为核酸(DNA/RNA)琼脂糖凝胶电泳的核心运行缓冲液,提供稳定的离子环境,维持电泳过程中的pH稳定性。

  • 核酸分离与鉴定:适用于PCR产物、质粒DNA、基因组DNA、RNA等核酸样品的电泳分析