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10×TBE 缓冲液(1 L,pH 8.3)

发布:2026-07-16 浏览:0次

10×TBE 缓冲液(1 L,pH 8.3)

基本属性

属性内容
产品名称10×TBE 缓冲液(10倍浓缩Tris-硼酸-EDTA电泳缓冲液)
规格1 L
pH(室温)8.3(自然稳定)
保存条件室温密封保存(无需高压灭菌)
使用方式使用时稀释10倍(如取100 mL定容至1 L,即得1×TBE工作液)

配方组成(1 L体系)

组分用量工作浓度(10×)CAS号
Tris 碱108 g100 mM77-86-1
硼酸(H₃BO₃)55 g10043-35-3
Na₂-EDTA·2H₂O7.44 g10 mM6381-92-6
去离子水定容至1 L

配制步骤

  1. 称取108 g Tris 碱55 g 硼酸7.44 g Na₂-EDTA·2H₂O,置于1 L烧杯中。

  2. 加入约800 mL去离子水,充分搅拌至完全溶解。

  3. 溶液的pH值应自然稳定在8.3(Tris与硼酸的比例决定了缓冲pH),若需微调,可滴加少量硼酸Tris碱进行调节。

  4. 转移至1 L容量瓶,用去离子水定容至1 L,充分混匀。

  5. 室温保存无需高压灭菌

关键注意事项

  • 自然pH 8.3:Tris碱(108 g)与硼酸(55 g)的配比决定了体系的缓冲pH,溶液pH应自然稳定在8.3,通常无需大幅调节。

  • EDTA溶解要点:若Na₂-EDTA·2H₂O溶解困难,可滴加少量NaOH溶液助溶(EDTA在碱性条件下溶解度更高)。

  • 无需灭菌:TBE为电泳用缓冲液,无需高压灭菌。使用去离子水配制并在洁净条件下操作即可。

  • 沉淀复溶:长期储存可能产生硼酸沉淀(硼酸在低温或高浓度下析出),若出现沉淀,37 ℃水浴加热溶解后即可正常使用,不影响电泳效果。

  • 稀释使用:使用时按10倍稀释(如取100 mL 10×TBE加去离子水定容至1 L,即得1×TBE工作液)。

主要应用

  • 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) :是聚丙烯酰胺凝胶电泳的首选缓冲液,对核酸小片段的分离具有极佳分辨率。

  • 琼脂糖凝胶电泳:适用于小片段DNA/RNA(<1 kb)的琼脂糖凝胶电泳分析。

  • DNA测序凝胶电泳:经典测序凝胶体系的缓冲液选择