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10×TBE 缓冲液(1 L,pH 8.3)
10×TBE 缓冲液(1 L,pH 8.3)
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 10×TBE 缓冲液(10倍浓缩Tris-硼酸-EDTA电泳缓冲液) |
| 规格 | 1 L |
| pH(室温) | 8.3(自然稳定) |
| 保存条件 | 室温密封保存(无需高压灭菌) |
| 使用方式 | 使用时稀释10倍(如取100 mL定容至1 L,即得1×TBE工作液) |
配方组成(1 L体系)
| 组分 | 用量 | 工作浓度(10×) | CAS号 |
|---|---|---|---|
| Tris 碱 | 108 g | 100 mM | 77-86-1 |
| 硼酸(H₃BO₃) | 55 g | — | 10043-35-3 |
| Na₂-EDTA·2H₂O | 7.44 g | 10 mM | 6381-92-6 |
| 去离子水 | 定容至1 L | — | — |
配制步骤
称取108 g Tris 碱、55 g 硼酸、7.44 g Na₂-EDTA·2H₂O,置于1 L烧杯中。
加入约800 mL去离子水,充分搅拌至完全溶解。
溶液的pH值应自然稳定在8.3(Tris与硼酸的比例决定了缓冲pH),若需微调,可滴加少量硼酸或Tris碱进行调节。
转移至1 L容量瓶,用去离子水定容至1 L,充分混匀。
室温保存,无需高压灭菌。
关键注意事项
自然pH 8.3:Tris碱(108 g)与硼酸(55 g)的配比决定了体系的缓冲pH,溶液pH应自然稳定在8.3,通常无需大幅调节。
EDTA溶解要点:若Na₂-EDTA·2H₂O溶解困难,可滴加少量NaOH溶液助溶(EDTA在碱性条件下溶解度更高)。
无需灭菌:TBE为电泳用缓冲液,无需高压灭菌。使用去离子水配制并在洁净条件下操作即可。
沉淀复溶:长期储存可能产生硼酸沉淀(硼酸在低温或高浓度下析出),若出现沉淀,37 ℃水浴加热溶解后即可正常使用,不影响电泳效果。
稀释使用:使用时按10倍稀释(如取100 mL 10×TBE加去离子水定容至1 L,即得1×TBE工作液)。
主要应用
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) :是聚丙烯酰胺凝胶电泳的首选缓冲液,对核酸小片段的分离具有极佳分辨率。
琼脂糖凝胶电泳:适用于小片段DNA/RNA(<1 kb)的琼脂糖凝胶电泳分析。
DNA测序凝胶电泳:经典测序凝胶体系的缓冲液选择
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