TE缓冲液（100 mL，pH 8.0）

基本属性

配方组成

配制步骤

1. 称取0.121 g Tris 碱（或直接取1 mL 的1M Tris-HCl储备液），量取0.2 mL 的0.5M EDTA储备液，置于100 mL烧杯中。

2. 加入约80 mL 去离子水（ddH₂O） ，搅拌至Tris完全溶解。

3. 若使用Tris碱，需滴加浓HCl调节pH至8.0。EDTA在pH < 8.0时很难完全溶解，确保最终pH稳定在8.0。

4. 用去离子水定容至100 mL，充分混匀。

5. 灭菌处理（二选一）：

• 121 ℃高压灭菌20分钟；或

• 0.22 μm滤膜过滤除菌。

6. 室温或4 ℃密封保存。

关键注意事项

• pH调节是溶解关键：EDTA在pH < 8.0时溶解度极低，若配制过程中溶液浑浊，通常因pH偏低，调高pH至8.0即可变澄清。

• 两种Tris来源可选：可用Tris碱固体（需调pH）或1M Tris-HCl储备液（已调好pH，无需再调）。使用储备液可简化操作。

• 灭菌方式按用途选择：

• 用于保存DNA → 推荐高压灭菌（有效去除DNase）。

• 用于重溶RNA → 必须使用DEPC处理水配制，并采用过滤除菌（避免高压灭菌导致DEPC分解产生致癌物）。

• EDTA储备液确保pH 8.0：使用前确认0.5M EDTA储备液已调至pH 8.0且完全溶解，否则会影响TE缓冲液的最终pH和澄清度。

主要应用

• DNA/RNA溶解与保存：TE缓冲液为核酸提供稳定的pH环境，EDTA螯合金属离子抑制核酸酶活性，是核酸长期保存的首选介质。

• 分子生物学常规实验：作为稀释液、反应体系补充液等通用缓冲液。

• 核酸纯化中的洗脱与复溶：柱纯化后的核酸洗脱，或沉淀后核酸的复溶