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RIPA裂解液（Radio Immunoprecipitation Assay Lysis Buffer）是一种经典的细胞组织快速裂解液，广泛用于从动物细胞和组织中提取可溶性蛋白。RIPA裂解液根据去垢剂组成和裂解强度分为强、中、弱三类，其中RIPA强裂解液因含有较高浓度的离子型去垢剂，裂解能力最强，适用于难溶性蛋白和亚细胞结构蛋白的提取。
RIPA强裂解液的核心成分为：50mM Tris（pH 7.4）、150mM NaCl、1% Triton X-100、1%脱氧胆酸钠、0.1% SDS。其中0.1% SDS和1%脱氧胆酸钠的协同作用能够有效破坏细胞膜和核膜结构，提取核蛋白和膜蛋白的效率显著优于中、弱型裂解液。产品中添加了钒酸钠、氟化钠、EDTA、亮肽素等多种蛋白酶和磷酸酶抑制剂，可有效抑制蛋白降解。部分厂家产品附赠一支100mM PMSF（通常100×），使用前需加入至终浓度1mM。
选择RIPA裂解液型号时，核心依据是目标蛋白的定位和性质。若目标蛋白位于细胞核或与细胞膜紧密结合，或需最大程度提取难溶性蛋白，建议选用强型。若需保持蛋白天然相互作用（如Co-IP实验），则需权衡裂解强度对蛋白复合物的破坏作用——裂解力越强，蛋白复合物被拆解的概率越高。对于常规细胞质蛋白提取，中、弱型裂解液通常已足够，可避免过度裂解带来的背景干扰和不必要的蛋白变性。
使用RIPA强裂解液时需严格遵循低温操作原则，使用前数分钟内加入PMSF至终浓度1mM（不可一次性全部加入裂解液中长期存放，因PMSF在水溶液中半衰期极短）。贴壁细胞去除培养液后PBS洗涤一次，6孔板每孔加入150-250μL裂解液，冰上裂解15-30分钟，期间振荡2次；悬浮细胞按50-100万细胞/100μL比例加入裂解液。组织样品需剪成细小碎片（液氮冷冻研磨效果更佳），按20mg组织加入150-250μL裂解液的比例处理，用玻璃匀浆器冰上匀浆。裂解后4℃、10000-14000g离心3-5分钟取上清。若裂解产物中出现一小团透明胶状物，为含基因组DNA的蛋白复合物，属正常现象——若目标蛋白不与DNA紧密结合，离心取上清即可；若需检测与基因组紧密结合的核蛋白（如组蛋白、转录因子），建议超声处理（功率100-200W，每次3-5秒，间隔10秒，共3-5次）后离心取上清。蛋白浓度测定因含高浓度去垢剂，Bradford法（考马斯亮蓝法）会受干扰导致结果偏高，推荐使用BCA法。
杭州富沃克生物科技有限公司提供RIPA强裂解液产品，采用经典配方，有效裂解细胞膜与核膜，提取膜蛋白与核蛋白效率高，适用于Western Blot、IP等蛋白分析实验场景。
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