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RNA保存液(非冻型组织RNA保存液)
RNA保存液是一种水相、无毒的组织保存试剂,可在非冻状态下快速渗透新鲜组织,在原位稳定和保护细胞内的RNA。它能立即抑制RNase活性,防止RNA降解,使样本可在常温下安全储存与运输,免除了对液氮或超低温冰箱的依赖。操作简便,即浸即存,是保障RNA分析结果可靠性的关键试剂。
技术原理
RNA保存液的核心作用机制基于快速渗透与原位保护的双重策略:
1. 快速渗透组织
作为一种水溶性的组织保存试剂,RNA保存液能够迅速渗入新鲜组织内部,在数分钟内穿透细胞膜,抵达细胞内部。它能在基因表达发生应急改变前快速锁定RNA状态,使后续分析更真实反映取样时的基因表达谱。
2. 高效抑制RNase
渗入细胞后,试剂中的有效成分能够完全抑制内源性RNase的活性,使其无法降解RNA分子。即使对于脾脏等RNase含量极为丰富的组织,也能保证良好的保护效果。
3. 原位保护RNA
在抑制RNase的同时,试剂将细胞内的RNA稳定在天然状态,保护其免受降解,使组织中的基因表达谱得以完整保存。经本产品保存的样本提取的RNA,质量与液氮速冻保存的样本相当。
核心优势
1. 非冻型保存,无需液氮
本品使样本保存不再需要液氮、干冰或-80℃冰箱。经本品处理的样品可在37℃保存1天,室温(25℃)保存1周,4℃保存1个月,在-20℃或-80℃可长期保存(组织不冻结)。特别适用于临床取样、野外采样、大规模样本采集与长途运输等场景。
2. 保护RNA完整性,效果与液氮一致
本产品可迅速渗透到组织内部,完全抑制RNase,避免RNA降解,保持组织RNA的完整性,从而完美保存组织中的基因表达谱。其效果与液氮冻存的效果一致。
3. 支持反复冻融
在RNA保存液中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。推荐使用本产品在-20℃或-80℃冻存的样品,反复冻融3-5次不会显著影响RNA的质量。
4. 安全无毒,操作友好
本品为无毒、无刺激性的水溶性液体试剂。操作过程中无需特殊防护,对实验人员健康友好。同时,使用本产品可有效避免液氮超低温引起的冻伤、离心管爆裂等安全问题。
5. 兼容多种RNA提取方法
本品与绝大多数RNA分离方法相兼容,包括TRIzol法、离心柱法、玻璃结合法(如Qiagen RNeasy)、酸酚抽提法等。残留少量保存液不影响后续提取RNA的质量。
适用样本类型
本产品广泛适用于多种生物样本类型:
细胞样本:培养细胞、悬浮细胞(白细胞、流式细胞仪收集的细胞)
其他:果蝇、病毒等
不适用样本:表面有蜡质或硬壳类的生物体样本;冰冻组织不能用本品保存,因为本品不能有效渗入冰冻组织。
操作指南
计算用量:RNA保存液的用量应为组织体积的10倍(如100mg组织约用1mL保存液);离心收集2×10⁶细胞约需1mL保存液。
样本处理:快速将较大的组织切成厚度<0.5cm的薄片,立即完全浸入RNA保存液中。组织过厚则保存液不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入。
保存条件与有效期
| 项目 | 规格 |
|---|---|
| 保存条件 | 室温保存 |
| 有效期 | 2年 |
| 低温贮存 | 低温贮存可能会产生沉淀或晶体析出,使用前需60℃孵育至沉淀完全溶解 |
| 仅限科研使用 | 仅供实验室研究与分析测试使用 |
典型应用场景
1. 临床样本采集与运输
手术或活检获取的组织样本,可立即浸入保存液中,常温运输至实验室进行后续RNA提取。
2. 野外采样与现场采集
生态学、流行病学等需要野外采集样本的研究,无需携带液氮罐,极大简化了采样流程。
3. 大规模样本筛选
队列研究、药物筛选等需要批量采集样本的项目,可先统一保存样本,再集中进行RNA提取。
4. 样本长途运输
5. 实验时间窗口管理
当实验安排无法在样本采集后立即进行RNA提取时,可使用本产品暂存样本,灵活安排实验进度。
6. RNA提取前的样本积累
在需要积累足够数量的样本后再统一提取RNA时,本产品可确保各批次样本的RNA质量一致。
RNA保存液以高效抑制RNase的核心机制、室温保存的灵活便捷、与液氮相当的RNA保护效果,让研究人员从液氮的束缚中解放出来,使RNA样本的采集、保存与运输变得前所未有的简单、灵活、可靠。

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