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RNase A溶液(10 mg/mL)
RNase A溶液(10 mg/mL)是一种即用型核糖核酸内切酶,专为分子生物学实验中的RNA去除需求设计。本品为高度纯化的牛胰核糖核酸酶A(Ribonuclease A, RNase A),以10 mg/mL的稳定溶液形式提供。经严格处理不含DNase和蛋白酶活性,使用前无需热处理,可直接用于质粒DNA和基因组DNA制备过程中RNA的消化去除,也可用于去除蛋白样品中的RNA污染。
核心参数
| 项目 | 规格 |
|---|---|
| 产品名称 | RNase A溶液(10 mg/mL) |
| 英文名称 | RNase A Solution(10 mg/mL) |
| CAS号 | 9001-99-4 |
| 分子量 | 约13.7 kDa(单体) |
| 浓度 | 10 mg/mL |
| 保存缓冲液 | 50 mM Tris-HCl (pH 7.4),50% (v/v) 甘油 |
| 保存条件 | -25~-15℃保存;稳定性强,-20℃保存3年以上,经常使用可4℃放置 |
| 运输条件 | 冰袋运输 |
| 有效期 | 1-2年 |
作用原理
RNase A是一种核糖核酸内切酶(endoribonuclease),可特异性降解单链RNA上的胞嘧啶(C)或尿嘧啶(U) 残基。具体来说,它切割核苷酸5'-核糖与邻近嘧啶核苷3'-核糖上磷酸基团之间的磷酸二酯键,产生的2',3'-环磷酸可水解成相应的3'-核苷磷酸盐。RNase A不会水解DNA,因为DNA缺少形成环形中间体必需的2'-OH。
RNase A在多种反应条件下均有活性:在低盐浓度(0-100 mM NaCl) 下,可切割单链RNA、双链RNA及RNA-DNA杂交链中的RNA链;在高盐浓度(≥0.3 M NaCl) 下,则仅特异性切割单链RNA。
核心优势
DNase和蛋白酶 free,无需热处理
本品经严格处理,不含DNase和蛋白酶活性。与普通RNase A不同,使用前无需热处理(煮沸)灭活DNase,可直接使用,大幅简化实验流程。
即用型溶液,浓度精准
以10 mg/mL溶液形式提供,无需称量粉末、无需自行溶解配制。避免了粉末称量时的粉尘暴露和配制误差,即开即用。
高度稳定,储存便捷
在-20℃条件下可稳定保存3年以上。若实验室经常使用,可置于4℃存放,方便随时取用。
专一性强,不损伤DNA
RNase A仅特异性降解RNA,对DNA分子无任何切割活性。在核酸纯化流程中可安全使用,在彻底去除RNA污染的同时,保障DNA的完整性与后续实验的准确性。
核心应用场景
1. 质粒DNA制备中去除RNA(最核心应用)
在质粒提取过程中,RNase A用于消化残留的RNA,是获得高纯度质粒DNA的关键步骤。本品不含DNase,不会对质粒DNA造成损伤。
使用方法:
方法一:RNase A在质粒中的终浓度推荐为100 μg/mL,即在质粒溶液中按1/100体积加入10 mg/mL RNase A即可(如50 μL质粒中加入0.5 μL RNase A溶液),37℃孵育10分钟。
方法二:将10 mg/mL RNase A溶液按照每mL质粒提取溶液I加入约20 μL RNase A溶液,充分悬浮菌体后37℃孵育10分钟。
2. 基因组DNA纯化中去除RNA
在基因组DNA提取过程中,用于消化残留的RNA,提高DNA纯度。每个样品通常加入20 μL RNase A。
3. 蛋白样品中去除RNA污染
在蛋白纯化过程中,用于去除蛋白样品中的RNA污染,避免RNA对蛋白定量、电泳或活性测定等实验产生干扰。
4. 其他分子生物学应用
使用注意事项
工作浓度:推荐工作浓度为1-100 μg/mL,具体因应用类型的不同而异。
容器选择:RNase A会吸附到玻璃表面,操作中应尽量避免因此导致的损失,建议将配制好的溶液装入塑料离心管保存和使用。
稀释方法:如需稀释,请用无菌去离子水(超纯水)或无菌无酶水。
安全操作:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
仅限科研使用:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途。
品质保障
本品为高度纯化的RNase A制剂,经严格质量控制不含DNase和蛋白酶活性。每批次产品经过严格质检,确保酶活性的稳定性与批次间一致性。

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