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名称:10X loading buffer
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本品为10×核酸电泳上样缓冲液,是一款高浓度即用型试剂,可与核酸样品按比例快速混匀后直接上样。内含甘油增加样品密度,确保点样时稳定沉降不扩散;同时含有溴酚蓝与二甲苯青双色指示剂,可同步监测电泳进程。
详细说明:

10×核酸电泳上样缓冲液(双色指示)

10×核酸电泳上样缓冲液(DNA/RNA Loading Buffer, 10×)是一款高浓度的即用型试剂,专为核酸凝胶电泳实验设计。本品含有密度指示剂双色电泳指示染料,与核酸样品按比例混合后即可直接上样,是分子生物学实验中保障上样操作便捷性与条带分离清晰度的高效辅助试剂。

本产品适用于非变性的琼脂糖凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳。除常规双链DNA和总RNA外,也可用于单链DNA、DNA引物、小RNA或分离纯化的特定RNA的电泳。本产品不含有甲醛等变性剂,不适用于变性RNA的电泳

核心组分与作用原理

本产品的功能实现依赖于其核心组分的协同作用:

甘油——确保样品有效沉降

甘油(Glycerol)的加入显著增加了样品的密度。当本品与样品混合稀释至1×工作浓度后,比重仍然较大,加样后极易下沉,可确保样品稳定沉入凝胶加样孔底部,有效防止样品飘出加样孔

双色指示剂——精准监测电泳进程

本品含有溴酚蓝(Bromophenol Blue)二甲苯青FF(Xylene Cyanol FF) 两种示踪染料。二者在电泳过程中会随核酸样品一同向前迁移,通过肉眼即可实时追踪样品的大致位置,便于实验人员精准判断电泳进度,适时终止电泳,避免核酸样品跑出凝胶

溴酚蓝和二甲苯青在琼脂糖凝胶中的迁移速率与特定大小的双链线性DNA分子相近

指示剂在0.5%~1.5%琼脂糖凝胶中的对应DNA大小
溴酚蓝300 bp
二甲苯青FF4 kb

注:二者在PAGE中的迁移速率随凝胶浓度改变而变化

EDTA——保护核酸完整性

EDTA(乙二胺四乙酸)作为金属离子螯合剂,能够有效结合体系中的二价金属离子(如Mg²⁺),抑制金属离子依赖性核酸酶的活性,保护DNA样品在电泳前及电泳过程中不被降解

核心优势

1. 即用型高浓度,操作便捷

本品为10倍浓缩液,使用时只需按比例稀释即可。标准操作:每9 μL核酸样品加入1 μL本品(即10倍稀释),吹打混匀后即可直接上样电泳。无需自行配制各组分,有效避免了人工配制过程中的浓度偏差与污染风险。

2. 双色指示,电泳进程一目了然

溴酚蓝与二甲苯青双色指示剂可同步监测电泳进程。蓝色条带清晰可见,便于实验人员根据指示剂的位置判断核酸片段的迁移情况,避免电泳时间不当导致的样品跑出或分离不充分。

3. 兼容性强,应用广泛

本产品广泛兼容多种核酸样品类型与电泳体系

  • 样品类型:双链DNA、总RNA、单链DNA、DNA引物、小RNA等

  • 凝胶类型:非变性琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳

使用方法

  1. 取DNA或RNA样品与本品按9:1的比例混合均匀(例如:9 μL核酸样品 + 1 μL 10×上样缓冲液)

  2. 用移液器反复吹打或轻微涡旋混匀。

  3. 将混合液缓慢加入至已被电泳缓冲液浸没的凝胶加样孔内。

  4. 接通电源,开始电泳。

注意事项

  • RNase污染防护:环境中存在较多的RNase,操作过程中须严格注意避免RNase污染。建议戴口罩吸取本品,并尽量减少本品暴露于空气中的时间,取用后立即盖上盖子

  • 避免反复冻融:建议第一次使用时对本产品适当进行分装,尽量避免反复冻融

  • 适用性限制:本产品不含有甲醛等变性剂,不适用于变性RNA的电泳,如有需要可使用专用的RNA上样缓冲液

  • 仅限科研使用:本产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗

储存条件

建议于-20℃保存,两年有效;4℃保存,至少一个月有效

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