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6×核酸电泳上样缓冲液（双色指示）

6×核酸电泳上样缓冲液（6×DNA/RNA Loading Buffer）是一款高倍浓缩的即用型试剂，专为核酸琼脂糖凝胶电泳及非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）设计。本品含溴酚蓝与二甲苯青FF双色指示剂，可实时监测电泳进程；高浓度甘油确保样品在点样孔中稳定沉降，防止飘出。使用时按比例与核酸样品混合即可直接上样，是分子生物学实验中提升上样操作便捷性与条带分离清晰度的常用辅助试剂。

本产品适用于非变性琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）电泳，可用于双链DNA、总RNA、单链DNA、DNA引物及小RNA等多种核酸样品的上样处理。本产品不含有甲醛等变性剂，不适用于变性RNA的电泳。

核心组分与作用原理

本产品的功能实现依赖于其核心组分的协同作用：

甘油——确保样品有效沉降

甘油（Glycerol）显著增加了样品的密度。当本品与样品混合稀释至1×工作浓度后，比重仍然较大，加样时极易下沉，可确保样品稳定沉入凝胶加样孔底部，有效防止样品飘出加样孔。

双色指示剂——精准监测电泳进程

本品含有溴酚蓝（Bromophenol Blue） 和二甲苯青FF（Xylene Cyanol FF） 两种示踪染料。二者在电泳过程中会随核酸样品一同向前迁移，通过肉眼即可实时追踪样品的大致位置，便于实验人员精准判断电泳进度，适时终止电泳。

在0.5%~1.5%的琼脂糖凝胶（0.5×TBE电泳缓冲液）中，二甲苯青的迁移速率与约4 kb的双链线性DNA分子相近，溴酚蓝的迁移速率与300 bp的双链线性DNA分子相近。二者在PAGE中的迁移速率则随凝胶的浓度改变而变化。

EDTA——保护核酸完整性

EDTA（乙二胺四乙酸）作为金属离子螯合剂，能够有效结合体系中的二价金属离子（如Mg²⁺），抑制金属离子依赖性核酸酶的活性，保护DNA样品在电泳前及电泳过程中不被降解。

主要应用场景

本产品广泛适配以下实验场景：

• DNA琼脂糖凝胶电泳：PCR产物鉴定、质粒DNA酶切分析、基因组DNA质量检测等

• 非变性RNA琼脂糖凝胶电泳：总RNA或特定RNA的质量评估

• 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） ：核酸片段的高分辨率分离分析

• 核酸样品上样前的常规处理

使用方法

1. 将1倍体积的6×核酸电泳上样缓冲液与5倍体积的核酸样品混合（即6倍稀释）。例如：5 μL核酸样品中加入1 μL本品。

2. 用移液器反复吹打或轻微涡旋混匀，短暂离心。

3. 将混合液缓慢加入至已被电泳缓冲液浸没的凝胶加样孔内。

4. 接通电源，开始电泳。

储存与注意事项

• 储存条件：4℃可保存12个月，-20℃可长期保存。若使用次数频繁，可分装成小份存放于4℃。

• 避免反复冻融：建议第一次使用时对本产品适当进行分装，尽量避免反复冻融。

• RNase污染防护：环境中存在较多的RNase，操作过程中须严格注意避免RNase污染。建议戴口罩吸取本品，并尽量减少本品暴露于空气中的时间，取用后立即盖上盖子。

• 仅限科研使用：本产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗。操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。

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