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核酸与蛋白质核心换算参数速查表
核酸与蛋白质核心换算参数速查表
一、核酸浓度换算(OD值与质量对应)
| 核酸类型 | 换算关系 | 说明 |
|---|---|---|
| 单链DNA(ssDNA) | 1 OD₂₆₀ = 33 μg | 常用紫外分光光度法定量 |
| RNA | 1 OD₂₆₀ = 40 μg | ⚠️ 表中“1OD₂₈₀”为笔误,实际应使用260 nm;NMP平均分子量345 Da |
💡 注意事项:OD₂₆₀读数需在pH 7.0条件下测定,核酸纯度(A₂₆₀/A₂₈₀比值)应介于1.8~2.0(DNA)或2.0~2.2(RNA)。
二、蛋白质浓度换算(OD值与质量对应)
| 蛋白质类型 | 换算关系 | 说明 |
|---|---|---|
| 牛血清白蛋白(BSA) | 1 OD₂₈₀ = 1.67 mg | 适用于纯化BSA定量 |
| BSA(反向换算) | 1 mg/mL = 0.6 OD₂₈₀ | 常用标准品换算 |
| 氨基酸平均分子量 | 110 Da | 用于估算蛋白质中氨基酸数目 |
三、核酸与蛋白质分子量换算
| 换算类型 | 换算关系 | 应用场景 |
|---|---|---|
| DNA → 蛋白质 | 1 kb DNA = 37 kDa 蛋白质 | 估算基因编码蛋白大小 |
| 蛋白质 → DNA | 10 kDa 蛋白质 = 273 bp DNA | 估算蛋白对应的基因长度 |
四、脱氧核糖核苷三磷酸(dNTP)消光系数(pH 7.0,λ=260 nm)
| 核苷酸 | 消光系数 ε (L/(mol·cm)) |
|---|---|
| dATP | 15.2 × 10⁻³ |
| dCTP | 7.4 × 10⁻³ |
| dGTP | 11.5 × 10⁻³ |
| dTTP | 8.3 × 10⁻³ |
五、寡核苷酸(DNA)1 OD₂₆₀ 对应参数
| 长度(碱基数) | 平均分子量(Da) | 平均重量数(μg) | 平均摩尔数(nmol) |
|---|---|---|---|
| 5 Base | 1,650 | 33 | 20.0 |
| 10 Base | 3,300 | 33 | 10.0 |
| 15 Base | 4,950 | 33 | 6.7 |
| 20 Base | 6,600 | 33 | 5.0 |
| 25 Base | 8,250 | 33 | 4.0 |
| 30 Base | 9,900 | 33 | 3.3 |
💡 规律:1 OD₂₆₀ 的寡核苷酸重量恒为33 μg,摩尔数随碱基数增加而减少(摩尔数 = 33 μg / 分子量)。
六、寡核苷酸(DNA)精准计算公式(基于碱基组成)
| 计算项 | 公式 | 说明 |
|---|---|---|
| 重量数(μg) | 重量数 = [330 × Base数] / [(15.2×A) + (7.4×C) + (11.5×G) + (8.3×T)] | 330为核苷酸平均分子量;A、C、G、T为对应碱基个数 |
| 摩尔数(μmol) | 摩尔数 = 1 / [(15.2×A) + (7.4×C) + (11.5×G) + (8.3×T)] | 基于1 OD₂₆₀ 的消光系数计算 |