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考马斯亮蓝 R-250 染色液（约1 L）
考马斯亮蓝 R-250 染色液（约1 L）
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 考马斯亮蓝 R-250 染色液 |
| 规格 | 约1 L |
| 主要成分 | 0.1% 考马斯亮蓝 R-250 + 25% 异丙醇 + 10% 冰醋酸 |
| 保存条件 | 室温密封保存 |
| 主要用途 | SDS-PAGE 蛋白凝胶染色 |
配方组成（约1 L体系）
| 组分 | 用量 | 终浓度 | CAS号 |
|---|---|---|---|
| 考马斯亮蓝 R-250 | 1 g | 0.1%（W/V） | 6104-59-2 |
| 异丙醇 | 250 mL | 25%（V/V） | 67-63-0 |
| 冰醋酸 | 100 mL | 10%（V/V） | 64-19-7 |
| 去离子水 | 650 mL | — | — |
配制步骤
称取1 g 考马斯亮蓝 R-250，置于1 L烧杯中。
量取250 mL 异丙醇加入烧杯中，搅拌至染料完全溶解（染料在异丙醇中溶解较快）。
加入100 mL 冰醋酸，搅拌均匀。
加入650 mL 去离子水，搅拌均匀。
用滤纸过滤去除不溶性颗粒物质。
转移至试剂瓶中，室温密封保存。
关键注意事项
⚠️ 废液处理：本溶液含有异丙醇和冰醋酸，属于有机废液，严禁直接倒入下水道，必须倒入专门的有机溶剂废液桶，按实验室危废规范处理。
过滤除杂：考马斯亮蓝染料中常有不溶性颗粒，配制后必须用滤纸过滤，否则染色时颗粒会附着在凝胶表面，造成背景不均匀。
pH/颜色说明：染料溶液呈深蓝色（紫蓝色），冰醋酸提供酸性环境（pH约2～3），酸性条件是染料与蛋白质结合的必要条件。
染色原理：考马斯亮蓝 R-250 在酸性条件下与蛋白质中的碱性氨基酸（精氨酸、赖氨酸、组氨酸）和疏水区域非特异性结合，形成蓝色复合物，实现蛋白条带的染色。
染色与脱色流程（参考）
| 步骤 | 操作 | 时间 |
|---|---|---|
| 染色 | 将凝胶浸入染色液中，室温摇床孵育 | 1～4小时（或过夜） |
| 脱色 | 用脱色液（40%甲醇+10%冰醋酸或25%乙醇+8%冰醋酸）洗脱背景 | 1～4小时（多次换液） |
| 保存 | 脱色后的凝胶可保存在去离子水中或拍照记录 | — |
主要应用
SDS-PAGE 蛋白凝胶染色（核心应用）
蛋白质条带的可视化检测
Western Blot 前的蛋白电泳质控
