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5×Tris-Glycine Buffer（SDS-PAGE 电泳缓冲液）（1 L）
5×Tris-Glycine Buffer（SDS-PAGE 电泳缓冲液）（1 L）
基本属性
| 属性 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 5×Tris-Glycine SDS-PAGE 电泳缓冲液 |
| 规格 | 1 L |
| pH（未调节） | 约8.3（无需调节） |
| 保存条件 | 室温密封保存 |
| 使用方式 | 使用时稀释5倍（如200 mL 5× + 800 mL dH₂O = 1 L 1×工作液） |
| 主要用途 | SDS-PAGE蛋白电泳运行缓冲液（阳极和阴极缓冲液） |
配方组成（1 L体系）
| 组分 | 用量 | 工作浓度（5×） | CAS号 |
|---|---|---|---|
| Tris 碱 | 15.1 g | 0.125 M | 77-86-1 |
| 甘氨酸（Glycine） | 94 g | 1.25 M | 56-40-6 |
| SDS | 5.0 g | 0.5%（W/V） | 25155-30-0 |
| 去离子水 | 定容至1 L | — | — |
配制步骤
称取15.1 g Tris 碱、94 g 甘氨酸、5.0 g SDS，置于1 L烧杯中。
加入约800 mL去离子水，充分搅拌至完全溶解（SDS溶解较慢，需温和搅拌，避免起泡）。
用去离子水定容至1 L，充分混匀。
室温密封保存。
使用时稀释5倍（如取200 mL 5×缓冲液，加去离子水定容至1 L，即得1×工作液）。
稀释使用指南
| 需要1×工作液体积 | 5×储备液用量 | 去离子水用量 |
|---|---|---|
| 1 L | 200 mL | 800 mL |
| 500 mL | 100 mL | 400 mL |
| 200 mL | 40 mL | 160 mL |
关键注意事项
无需调节pH：Tris（15.1 g）与甘氨酸（94 g）的配比使溶液pH自然稳定在约8.3，无需使用HCl或NaOH调节。
SDS溶解要点：SDS室温溶解较慢，可温和搅拌或37 ℃水浴加热助溶，避免剧烈搅拌产生大量泡沫。
⚠️ 废液处理：含SDS的废液不可直接倒入下水道（SDS会产生大量泡沫，污染水体环境），需按实验室有机溶剂废液标准收集处理。
工作液使用：1×工作液中各组分为：25 mM Tris、192 mM 甘氨酸、0.1% SDS，这是SDS-PAGE电泳的标准运行缓冲液。
在SDS-PAGE中的功能
| 组分 | 在电泳中的功能 |
|---|---|
| Tris | 维持缓冲液pH约8.3，确保SDS-蛋白质复合物带负电荷 |
| 甘氨酸 | 在浓缩胶中形成不连续前沿，实现蛋白样品的浓缩效应；进入分离胶后作为跟随离子，维持稳定电场 |
| SDS | 补充电泳过程中消耗的SDS，维持蛋白质的SDS饱和状态 |
主要应用
SDS-PAGE蛋白电泳运行缓冲液（核心应用）
Laemmli SDS-PAGE不连续电泳系统
Western Blot前蛋白样品的电泳分离
