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饱和硫酸铵溶液是蛋白质分离纯化实验中应用最广泛的盐析试剂之一,通过高浓度盐离子竞争结合水分子,降低蛋白质溶解度使其沉淀析出,是抗体粗纯化、酶蛋白提取等实验的关键工具。硫酸铵分子量为132.14,室温下饱和硫酸铵溶液浓度约为4 mol/L。市售产品pH约为5.0-6.0,如需pH 7.4等中性条件,应用氨水或稀硫酸调节后使用。配制好的饱和硫酸铵溶液瓶底应有结晶析出,以确保持续处于饱和状态,室温密封保存有效期约12个月。
硫酸铵盐析法的原理是利用不同浓度的中性盐使不同蛋白依次沉淀——当高浓度盐加入蛋白溶液时,铵离子和硫酸根离子与蛋白质竞争水分子,破坏蛋白质表面的水化膜,降低其溶解度使之沉淀析出。免疫球蛋白通常在40%-50%饱和度硫酸铵中沉淀,白蛋白等杂蛋白在更低浓度即可沉淀。该方法操作简单、成本低、处理量大,适合大批量初步纯化,但纯度不够高,易受其他蛋白质共沉淀污染,通常作为纯化的第一步粗提步骤,后续需配合层析等方法进一步精纯。盐析后必须充分透析除去铵离子,否则残留的铵离子会严重影响后续的亲和层析步骤。
操作时需在冰浴上边搅拌边缓慢滴加饱和硫酸铵溶液,防止局部浓度过高导致蛋白变性。硫酸铵因高溶解度、温度系数小、不易使蛋白质变性等优点,成为蛋白质盐析的首选盐类。本产品仅限科研使用。
杭州富沃克生物科技有限公司提供高品质饱和硫酸铵溶液产品,采用高纯原料与超纯水精准配制,浓度饱和、批次稳定,适用于蛋白质盐析沉淀、抗体粗提等实验场景。
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