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名称:8M尿素溶液
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8M尿素溶液是生物化学与分子生物学实验中核心的蛋白质变性试剂,作为一种高浓度离液剂,能够有效破坏蛋白质二级、三级结构中的氢键等非共价作用力,使蛋白质完全变性和溶解。尿素分子式为CH₄N₂O,分子量60.06。8M尿···
详细说明:

8M尿素溶液是生物化学与分子生物学实验中核心的蛋白质变性试剂,作为一种高浓度离液剂,能够有效破坏蛋白质二级、三级结构中的氢键等非共价作用力,使蛋白质完全变性和溶解。尿素分子式为CH₄N₂O,分子量60.06。

8M尿素的蛋白质变性作用基于两种协同效应:通过氢键直接与肽链的酰胺基团结合,破坏蛋白质内部的氢键网络;同时置换非极性基团周围溶剂壳层中的水分子,削弱疏水效应。在核酸研究中,尿素同样能破坏DNA和RNA二级结构中的氢键,常用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。

该溶液在蛋白质和核酸研究中具有多项核心应用。包涵体蛋白溶解方面,重组蛋白在大肠杆菌中表达时常形成不溶性的包涵体,8M尿素可有效溶解包涵体中的聚集蛋白,溶解度为70%-90%。SDS-PAGE和双向电泳中,8M尿素是样品制备的核心组分,用于使蛋白质完全变性和解聚,双向电泳样品溶液中尿素浓度通常要求不低于8M。对于膜蛋白等难以通过常规裂解液提取的蛋白,8M尿素可作为温和溶剂进行提取。在核酸研究中,尿素-PAGE测序胶制备等实验中,8M尿素使DNA双链完全打开,用于核酸序列分析。不同实验场景对尿素的纯度要求不同——常规SDS-PAGE样品制备使用普通分析纯尿素即可满足要求;双向电泳等对结果重复性要求较高的实验需使用高纯尿素,以避免杂质离子干扰等电聚焦;核酸相关实验应使用无核酸酶级尿素。

实验室自行配制1L 8M尿素溶液需称取480.48g尿素,加水定容至1L。尿素溶解过程吸热,室温下完全溶解需数小时,且尿素在溶液中易分解产生氰酸铵,因此需冷藏保存。尿素溶液不宜加热溶解,应避免长时间室温放置。商业化即用型产品以高纯尿素与超纯水精准配制,浓度准确、溶液澄清无杂质,采用无菌工艺制备,无核酸酶和蛋白酶污染,开瓶即用,可有效避免自行配制时尿素溶解困难、浓度不准和分解沉淀等问题。

8M尿素溶液应于4℃避光密封保存,防止分解变质。使用前如发现沉淀,可室温放置使析出的尿素重新溶解。变性实验时可根据需要加入还原剂以断裂二硫键,获得完全变性的蛋白质样品。仅限科研使用。

杭州富沃克生物科技有限公司提供高品质的8M尿素溶液产品,采用高纯尿素原料与超纯水精准配制,浓度准确、无菌无酶,每批次附带质检报告,适用于蛋白质变性电泳、包涵体溶解等实验场景。

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