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50×TAE电泳缓冲液
TAE电泳缓冲液(Tris-Acetate-EDTA Buffer)是分子生物学实验室中使用最为广泛的核酸电泳缓冲液之一。50×TAE电泳缓冲液作为高倍浓缩液,以Tris碱、乙酸和EDTA为核心组分,经优化配比与精密配制而成。使用时简单稀释即可获得高品质的工作液,为核酸的琼脂糖凝胶电泳提供稳定、可靠的分离环境。
一、核心组分与科学原理
本产品的功能依托于三种核心组分的协同作用,共同保障核酸在电泳过程中的稳定迁移与清晰分离。
Tris-乙酸盐缓冲系统:Tris提供稳定的弱碱性pH环境(1×工作液pH约为8.0-8.3);乙酸提供抗衡离子,共同维持电泳体系的离子强度和pH稳定,确保核酸在电场中稳定迁移。
EDTA(乙二胺四乙酸) :作为金属离子螯合剂,EDTA可有效结合体系中的Mg²⁺、Ca²⁺等二价阳离子。这些离子是DNase和RNase的必需辅因子,EDTA通过封闭这些离子,有效抑制核酸酶活性,防止DNA/RNA在电泳过程中被降解。
二、核心优势
1. 大片段DNA分离效果优异
对于大于13kb的大片段DNA,TAE缓冲液具有比TBE更佳的分离效果。这一特性使其成为基因组DNA分析、大分子超螺旋DNA分离等实验的首选。
2. DNA迁移率快,电泳高效
双链线状DNA在TAE中的迁移率较其他缓冲液快约10%。这一特性有助于在较短时间内完成电泳分离,提升实验效率。
3. DNA回收效率高,适配下游实验
TAE缓冲液不含硼酸,不会与琼脂糖生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物干扰回收效率。回收DNA片段时宜用TAE缓冲系统进行电泳,纯化后的DNA片段可直接用于酶切、连接、转化等下游实验。
4. 超螺旋DNA分子量更准确
超螺旋DNA在TAE中电泳时,测得的相对分子质量更符合实际值。而TBE中电泳时测出的相对分子质量往往会大于实际分子质量。
5. 浓缩液设计,储存使用灵活
50×浓缩形式既保证了储存的稳定性(室温保存即可),也方便实验人员根据实际用量灵活稀释,降低了单位实验的缓冲液成本与储存空间占用。
三、技术规格
| 项目 | 规格详情 |
|---|---|
| 产品名称 | 50×TAE电泳缓冲液 |
| 浓缩倍数 | 50× |
| 50×组分浓度 | 2 M Tris碱、1 M 冰醋酸、0.05 M EDTA |
| 1×工作液组分 | 40 mM Tris-乙酸盐,1–2 mM EDTA |
| pH(25℃) | 8.0-8.5(50×) |
| 外观 | 无色透明液体 |
| 无菌级别 | 0.22 μm滤膜过滤除菌 |
| 等级 | 分子生物学级,DNase/RNase free |
| 保存条件 | 室温(RT) |
| 有效期 | 至少12个月 |
四、使用方法
1×工作液配制:
取适量50×TAE浓缩液,使用蒸馏水或去离子水按1:50比例稀释(例如:10 mL 50×TAE + 490 mL 蒸馏水 = 500 mL 1×工作液),充分混匀即可使用。
注意事项:
五、TAE与TBE缓冲液的选择
| 特性 | TAE缓冲液 | TBE缓冲液 |
|---|---|---|
| 缓冲能力 | 相对较低,不适合长时间电泳 | 高,适合长时间电泳 |
| 最佳分离范围 | >13 kb大片段DNA | <1 kb小片段DNA |
| DNA回收效率 | 高,适合胶回收实验 | 低,硼酸影响回收 |
| 超螺旋DNA | 分子量更准确 | 分子量偏大 |
| 电泳速度 | 较快(约快10%) | 较慢 |
| 沉淀风险 | 稳定,不易沉淀 | 浓溶液长期存放易沉淀 |
对于分辨率要求不高时,使用TAE和TBE均可;对于分辨率要求比较高时,较低浓度的胶有利于提高大分子量核酸的分辨率,此时宜使用TAE;而较高浓度的胶有利于提高小分子量核酸的分辨率,此时宜使用TBE。
六、核心应用场景
本产品广泛适用于以下核酸电泳相关实验场景:
| 应用领域 | 工作浓度 | 用途说明 |
|---|---|---|
| DNA琼脂糖凝胶电泳 | 1× | DNA片段的分离、检测与回收 |
| DNA片段胶回收 | 1× | 推荐使用TAE体系,回收效率高于TBE |
| 大片段DNA电泳 | 1× | >13 kb大片段DNA分离效果佳 |
| 非变性RNA琼脂糖凝胶电泳 | 1× | RNA完整性检测 |
| 脉冲场凝胶电泳(PFGE) | 1× | 超大分子量DNA分离 |
| 凝胶制备缓冲液 | 1× | 与电泳缓冲液一致,适用于琼脂糖凝胶配制 |
50×TAE电泳缓冲液以经典的科学配方、优异的大片段分离能力、便捷的浓缩液形式以及稳定的品质保障,为核酸琼脂糖凝胶电泳提供了可靠、高效的分离体系。它让DNA与RNA的分离鉴定更加条带清晰、结果可靠,是分子生物学实验室值得信赖的基础试剂。
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