电话:19850855600
蛋白酶K溶液
蛋白酶K溶液(Proteinase K Solution)是一种活性稳定的广谱丝氨酸蛋白酶,能高效降解蛋白质并有效灭活核酸酶,是分子生物学实验中不可或缺的核心工具酶。本品为即用型溶液,浓度精准,经纯化去除RNase和DNase活性,可广泛应用于DNA/RNA提取、蛋白质印迹、原位杂交等多种实验场景。
产品来源与性质
蛋白酶K来源于真菌林伯氏白色念珠菌(Tritirachium album) ,属于枯草杆菌蛋白酶家族的丝氨酸蛋白酶。其分子量约为28.9-29.3 kDa。
本品为即用型溶液(浓度通常为10 mg/mL或20 mg/mL),经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性,可直接使用,无需称量、溶解等繁琐步骤。
技术原理
1. 高效降解蛋白质
蛋白酶K能够切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,可降解与核酸结合的蛋白质(如组蛋白),使DNA和RNA从样品中释放出来,游离到提取液中。
2. 快速灭活核酸酶
蛋白酶K可快速灭活内源核酸酶(如RNase和DNase),保护核酸在提取过程中免受降解。这一特性使其特别适用于从组织或细胞中分离天然RNA和DNA。
3. 在变性剂中活性增强
EDTA等螯合剂或SDS等去垢剂不能使蛋白酶K失活,反而增强和稳定酶活性。在变性剂如SDS(1%) 和高温(50-60℃) 存在下,其活性增加。
核心优势
1. 广谱pH与温度适应性
蛋白酶K在较广的pH范围(pH 4.0-12.5)内均有活性,最佳pH范围为pH 7.5-8.0。在高温(50-70℃)下仍保持活性,理想孵育温度为55-58℃。
2. 对变性环境高度稳定
本品在尿素和SDS中稳定,在0.1-0.5% SDS存在下可保持活性。EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、盐酸胍等对蛋白酶K的活力影响不大。
3. 高纯度,无核酸酶污染
本品经严格质量控制,不含可检测的DNase和RNase,确保不会对核酸样品造成额外降解。
4. 即用型溶液,使用便捷
本品为预配制的即用型溶液,开瓶即用,无需自行称量、溶解和配制,避免了称量损耗和操作误差,显著提高实验效率。
产品规格
核心应用场景
1. 核酸提取(最核心应用)
蛋白酶K在DNA和RNA提取过程中扮演着至关重要的角色。它能够降解与核酸结合的蛋白质,使DNA和RNA从样品中释放出来;同时快速灭活内源核酸酶(如RNase和DNase),保护核酸免受降解。
2. 原位杂交(ISH)
在原位杂交技术中,蛋白酶K通常用于杂交前标本的处理,具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以利于检测探针的穿透,提高检测的敏感性。
3. 蛋白质印迹(Western Blot)
蛋白酶K可用于制备脉冲电泳的染色体DNA和蛋白质印迹等实验。也可用于石蜡包埋组织切片的处理,暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
4. 病毒核酸检测
在新冠病毒等病毒核酸检测中,蛋白酶K是病毒采样液的重要组分,可裂解病毒释放核酸,消除核酸分解酶(RNase)以防止病毒RNA降解,同时可灭活病毒,提高运输和检测阶段的安全性。
5. 其他应用
使用与储存建议
1. 工作浓度
蛋白酶K的常用工作浓度为50-100 μg/mL;对于组织处理,推荐工作浓度为2 mg/mL。
2. 孵育条件
建议孵育温度为55-65℃,理想孵育温度为58℃。在37℃下,孵育时间通常为30分钟至2小时。
3. 灭活方法
4. 储存条件
本品建议2-8℃保存。如需更长期保存,可置于-20℃冷冻保存。避免反复冻融。
5. 注意事项

厂家联系微信号(同手机号):19850855600或扫二维码添加微信,可免费领取试用装(包邮):









