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ECL超敏发光液（飞克级）

ECL超敏发光液（Enhanced Chemiluminescence Substrate）是一种基于鲁米诺（Luminol）原理的高灵敏度化学发光底物。它专为Western Blot等实验设计，用于检测由辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗体所识别的目标蛋白。其核心优势在于能够实现飞克（fg）级别的超高灵敏度蛋白检测，同时具备背景低、信号稳定持久的特性。

技术原理

本产品的技术核心是增强型化学发光反应。其基本原理如下：

1. 酶促反应：当HRP标记的抗体与膜上的目标蛋白结合后，加入ECL工作液。工作液中的鲁米诺在HRP的催化下，与过氧化氢发生氧化反应。

2. 信号产生：此反应生成一种不稳定的过氧化物中间体。该中间体迅速分解，释放出能量并产生光信号（光子），其最大发射波长约为425纳米。

3. 信号放大：试剂中添加了新型高效增强剂，可将光信号强度提升30-100倍，从而实现飞克级的超高灵敏度。

核心优势

• 超高灵敏度：能够检测低至飞克（fg）级别的目标蛋白。这使得检测磷酸化蛋白、细胞因子等低丰度靶标成为可能。

• 长时信号稳定：发光信号持久稳定，可进行多次曝光。信号强度在30分钟后仍可维持约90%，6小时后仍能保持60%以上。部分产品的工作液在72小时内保持稳定。

• 低背景干扰：通过优化底物与增强剂配方，有效降低了非特异性背景信号，信噪比高，条带清晰。

• 节省抗体用量：由于其高灵敏度，可显著减少一抗和二抗的使用量。

• 安全便捷：采用非放射性检测方法，安全无毒。产品为即用型配方，操作简便。

产品规格与保存

• 常见规格：市场上提供多种规格，如120mL、250mL、500mL等，以适应不同规模的实验需求。

• 保存条件：通常建议在2-8℃避光保存。在推荐条件下，保质期可达12至24个月。注意不可结冰。

应用场景

本产品主要应用于以下实验技术：

• Western Blot（免疫印迹）：用于检测细胞或组织裂解液中的目标蛋白。

• EMSA（凝胶迁移或电泳迁移率实验）：用于检测核酸与蛋白质的相互作用。

• ELISA及其他免疫检测：适用于基于HRP标记抗体的各类化学发光免疫检测系统。

• 核酸检测：用于检测HRP标记的核酸探针。

使用建议与注意事项

• 工作液配制：使用前将试剂A液和B液按1:1等体积混合，现配现用。

• 膜的选择：PVDF膜比硝酸纤维素膜（NC膜）能更好地结合蛋白，信号更强。

• 操作规范：

• 确保膜在抗体孵育后始终保持湿润状态，否则可能导致高背景。

• 封闭要充分，洗涤要彻底。

• 不同厂家的试剂组分请勿混用。

• 背景优化：若背景过高，需检查封闭是否充分、洗涤是否彻底、二抗浓度是否过高。

总结：ECL超敏发光液是进行高灵敏度蛋白检测的优选试剂。其飞克级的灵敏度、持久的信号和低背景的特性，使其成为科研与临床实验室中检测痕量蛋白的有力工具。

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