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快速封闭液(即用型,无蛋白)
本品适用于院校分子生物教学实验,封闭速度快,可有效阻断非特异性结合,减少背景杂信号。解决常规封闭液耗时久、封闭不完全、实验结果模糊等问题。采用优化复合配方,精选温和原料配制,渗透均匀且不损伤样本活性。成品即开即用无需稀释,密封包装存放方便,适配WB、ELISA、免疫组化等实验,符合教学试剂标准,助力课堂实验顺利完成。
产品核心信息
| 项目 | 规格详情 |
|---|---|
| 产品名称 | 快速封闭液(即用型,无蛋白) |
| 产品品牌 | 富沃克生物(FWKBIO) |
| 产品特点 | 快速封闭、低背景、高信噪比、无蛋白配方 |
| 适用实验 | Western Blot(WB)、ELISA、免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)等 |
| 封闭时间 | 5-15分钟 |
| 产品形式 | 即用型液体,无需稀释 |
| 储存条件 | 2-8℃密封保存 |
| 保质期 | 12个月 |
| 产品特点 | 批次稳定、国标认定 |
产品概述
在Western Blot、ELISA及免疫组化等免疫学实验中,封闭是决定实验结果质量的关键环节。其核心目的在于阻断固相载体(如PVDF膜、NC膜或微孔板)表面的非特异性结合位点,从而避免后续一抗或二抗与载体发生非特异性吸附,有效降低背景干扰、提高信噪比。
本品是新一代的无蛋白快速封闭液,为多种聚合物的混合液,可快速填充固相支持物表面的空隙,减少非特异性信号的干扰。整体封闭效果明显优于传统的基于BSA、脱脂奶粉、酪蛋白等的封闭液。无蛋白配方,避免抗体与封闭剂的非特异结合,最大程度地降低了背景。
核心优势
1. 快速高效,大幅缩短实验时间
传统封闭液通常需要室温封闭1小时或4℃封闭过夜,严重拖慢了实验进度。本产品封闭时间通常仅需5-15分钟,封闭效果可等同或优于脱脂奶粉、BSA等传统封闭液。对于特异性好的抗体,可采用封闭液直接稀释一抗的方式,无需单独提前封闭步骤。
2. 低背景,高信噪比
本产品采用无蛋白配方,不与蛋白产生非特异性结合,因而只封闭膜而不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点,大大提高了抗体检测灵敏度。与传统的脱脂奶粉和BSA封闭相比,信噪比更高。Western blot的条带更清晰、杂带少、背景值极低。
3. 无蛋白配方,兼容性广泛
本产品不含任何蛋白质成分,原则上与抗体无交叉反应。无内源性磷酸化蛋白及生物素,对磷酸化特异性抗体及生物素检测也不会产生干扰。因此,本产品尤其适用于:
磷酸化特异性抗体的检测:避免传统封闭液中磷蛋白对检测的干扰
生物素-亲和素检测系统:不含生物素成分,不会产生假阳性信号
多种二抗标记体系:兼容辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(AP)和生物素标记的二抗
4. 应用广泛,一液多用
本产品不仅适用于Western Blot,也适用于ELISA、ICC及IHC的封闭和抗体孵育实验。一种产品满足多种实验需求。可用于回收一抗、二抗等。
5. 即开即用,操作便捷
本品为即用型液体,使用时无需稀释。开瓶即可直接使用,省去称量、溶解等繁琐步骤,有效避免人工配制过程中的污染风险与批次差异。
技术原理
转膜结束后,需对转印膜进行封闭。在转印膜上未结合蛋白的位置,有许多非特异性的结合位点,为避免其与抗体发生非特异性结合引起高背景,需使用含有惰性蛋白质或非离子去污剂的缓冲液封闭杂交膜上的非特异性位点。
传统封闭液(如脱脂奶粉、BSA)利用封闭液中的蛋白成分以吸附的方式结合于膜表面的空白间隙,从而避免一抗的非特异性结合。但这类方法存在诸多局限:脱脂奶粉可能含有生物素和碱性磷酸酶,干扰基于生物素-亲和素的检测系统;BSA在提纯过程中可能残留IgG或其他血清蛋白,与哺乳动物抗体产生交叉反应;且封闭耗时长(通常需1-2小时)。
本产品采用无蛋白配方,为多种聚合物的混合液,只结合封闭转印膜而不结合蛋白,因此不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点。同时,无蛋白配方有效避免了抗体与封闭剂的非特异结合,最大程度地降低了背景。实验结果背景低、信号强,信噪比更高。
使用说明
以Western Blot实验为例,标准操作流程如下:
完成转膜:将蛋白转印至PVDF膜或NC膜上。
(可选)洗涤:可用TBST或PBST缓冲液漂洗膜1-2分钟。
加入封闭液:根据膜的大小,加入足量本产品,确保完全浸没覆盖膜。
室温孵育:置于水平摇床上,室温振荡孵育5-15分钟(通常10分钟即可)。
后续实验:封闭完成后,可直接进行一抗孵育等后续操作。
注意:对于背景极高的抗体,可将封闭时间延长至30-60分钟,或于4℃封闭过夜。
产品参数
| 项目 | 规格 |
|---|---|
| 产品名称 | 快速封闭液(即用型,无蛋白) |
| 产品形式 | 即用型液体 |
| 储存条件 | 2-8℃密封保存 |
| 保质期 | 12个月 |
| 仅限科研与教学 | 仅供实验室研究与教学使用 |
品质保障
本品依托成熟的标准化生产工艺与严格的质量控制体系:
国标认定:产品符合教学与科研实验使用标准
批次稳定:每批次均有质检报告,有效避免实验重复差异性
高纯原料:甄选高纯原料,杂质含量低
专业质控:已服务1100+科研院所、2500+医院及医疗机构、750+生物及制药企业
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