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产品名称:8M尿素溶液(实验级/即用型)——蛋白质变性电泳与纯化的核心试剂
一、产品概述:生物大分子研究的“构象解锁器”
8M尿素溶液是生物化学与分子生物学实验中核心的蛋白质变性试剂之一。作为一种高浓度离液剂,尿素通过两种协同机制使蛋白质发生构象变化:一是直接与肽链的酰胺基团形成氢键,破坏蛋白质内部的氢键网络;二是置换非极性基团周围溶剂壳层中的水分子,削弱维持蛋白质三级结构的疏水相互作用。这两种作用的协同效应使蛋白质从天然的有序构象转变为完全伸展的无规则多肽链构象。
本产品适用于院校教学实训与生物科研实验,摩尔浓度精准恒定,溶液澄清无杂质,蛋白变性溶解能力强,可用于蛋白纯化、样本处理及缓冲体系配制。它有效替代了传统手工配制8M尿素溶液的操作流程,从根本上解决了自配溶解缓慢、浓度偏差、易分解沉淀等长期困扰实验人员的难题,帮助师生以标准化的试剂条件完成蛋白质变性电泳与纯化实验。
二、8M尿素溶液的核心应用与手工配制难点
1. 蛋白质研究中不可替代的变性剂
8M尿素溶液的应用贯穿蛋白质研究的多个核心环节。在包涵体蛋白溶解中,重组蛋白在大肠杆菌等表达系统中常形成不溶性的聚集体——包涵体。8M尿素可有效溶解包涵体中的聚集蛋白,溶解度为70%-90%,通过破坏蛋白分子间的氢键和疏水相互作用,使聚集的多肽链分散溶解。溶解后的包涵体蛋白可直接用于后续的纯化与复性操作。在蛋白质变性电泳中,SDS-PAGE和双向电泳的样品制备均需使用8M尿素使蛋白质完全变性和解聚,双向电泳样品溶液中尿素浓度通常要求不低于8M。在核酸研究中,8M尿素同样能破坏DNA和RNA二级结构中的氢键,常用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(尿素-PAGE)制备测序胶,使DNA双链完全打开,适用于核酸序列分析。对于膜蛋白等难以通过常规裂解液提取的蛋白,8M尿素也可作为温和溶剂进行提取。
2. 手工配制的常见痛点
实验室自行配制1L 8M尿素溶液需称取480g尿素,加水搅拌溶解后于棕色瓶中4℃保存。这一过程存在多重挑战。尿素溶解过程为吸热反应,室温下完全溶解需数小时,若加热超过60℃则会加速分解。更关键的是,尿素在溶液中易分解产生氰酸盐,氰酸盐可与蛋白质的氨基反应引起氨甲酰化修饰,改变蛋白质的电荷状态。配制中若按480g直接加1L水而非定容至1L,实际浓度约为7.98M,虽在教学实验中影响可能不大,但在需要精确比较结果的科研实验中,浓度偏差可能影响数据的可重复性。此外,尿素粉末称量过程中易产生粉尘,且溶液需过滤除菌处理,流程繁琐。本产品通过低温恒温溶合、多级过滤与密封包装,将上述问题全面解决。
三、核心特性
1. 高纯原料与超纯水,低温恒温溶合工艺
本产品采用高纯尿素原料(分子式CH₄N₂O,分子量60.06,CAS号57-13-6)搭配超纯水,经低温恒温溶合工艺精制。生产过程严格控制温度不超过37℃,有效避免尿素分解生成氰酸盐。成品经多级过滤处理,无核酸酶和蛋白酶污染,溶液澄清透明无杂质。
2. 浓度精准恒定,批次品质一致
每批次产品经严格质检,浓度准确(8mol/L),密度约1.34 g/cm³(20℃)。有效规避了手工配制时因称量误差、溶解不完全或水质问题导致的浓度偏差。标准化生产工艺保障批次间品质一致。
3. 避光密封包装防氧化防分解
尿素溶液在碱性条件下可使某些氨基酸发生氨甲酰化,室温放置超过48小时可能对目的蛋白产生影响。本产品采用避光密封瓶装,有效防止氧化与分解变质,开瓶即用无需繁琐配制。
四、典型应用场景
1. 包涵体蛋白溶解(核心应用)
将包涵体沉淀用本产品重悬,可根据需要加入5-10mM DTT或20-50mM β-巯基乙醇以打开二硫键,室温或4℃温和搅拌溶解适当时间后高速离心去除不溶物,取上清用于后续实验。
2. 蛋白质变性电泳样品制备
用于SDS-PAGE和双向电泳的样品制备,使蛋白质完全变性和解聚。双向电泳样品溶液中尿素浓度通常要求不低于8M,常与2M硫脲、4% CHAPS等配合使用。
3. 核酸变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
用于尿素-PAGE测序胶制备,使DNA双链完全打开,适用于核酸序列分析。
4. 蛋白质复性前处理
可采用逐步降低尿素浓度的方法实现复性(8M→6M→4M→2M→0M),一般在尿素浓度降至4M左右时开始复性,建议采用低浓度蛋白(0.1-1mg/mL)、平缓梯度和低温条件。
五、使用方法与注意事项
使用方法:使用前将溶液充分摇匀。根据实验设计直接移取所需体积使用。用于包涵体溶解时,按每克包涵体湿重加入10mL本产品的比例重悬,必要时加入还原剂后温和搅拌。需注意尿素溶液不可加热超过37℃,否则会生成氰酸盐导致蛋白氨基甲酰化。建议根据单次实验用量分装使用,避免反复冻融和长期室温放置。
注意事项:本产品仅供实验室专业用途,不可用于临床诊断或治疗。操作时建议佩戴实验手套与口罩,避免吸入或皮肤接触。尿素在碱性条件下可使某些氨基酸发生酰基化,开封后建议尽快使用完毕。产品出现浑浊、沉淀或颜色变化时请勿使用。储存于阴凉避光处,室温(15-30℃)或冷藏(2-8℃)密封保存。不可冷冻。
六、品质保障与订购信息
本产品严格执行分子生物学级试剂标准,每批次附带质检报告(COA),涵盖浓度验证、pH值、澄清度及核酸酶活性检测等指标,满足院校教学与科研实验记录追溯要求。
产品名称:8M尿素溶液(实验级/即用型)
包装规格:100mL/瓶、500mL/瓶(可根据教学与科研需求提供批量包装)
储存条件:室温(15-30℃)或冷藏(2-8℃)避光密封保存
保质期:12个月(以产品标签为准)
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