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Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液：大分子蛋白分离的“利器”，从配方到使用一篇讲清
一、Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液是什么？
Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液是一种专门用于Bis-Tris体系蛋白凝胶电泳的变性电泳缓冲液【3】【4】。它由Tris（维持pH）、MOPS（提供缓冲能力）、SDS（给蛋白披上负电荷“外套”）三大核心成分组成【1】【5】。
它跟传统的Tris-甘氨酸电泳缓冲液有什么区别？
| 对比项 | Tris-MOPS-SDS | Tris-甘氨酸-SDS |
|---|---|---|
| 适用凝胶体系 | Bis-Tris凝胶体系（如NuPAGE系统）【1】【3】 | Tris-甘氨酸凝胶体系 |
| 优势蛋白范围 | 中到大分子量蛋白（>30 kDa） 【1】【3】 | 常规蛋白（10-300 kDa） |
| 电泳速度 | 较快（可恒定200V）【2】 | 常规速度 |
| 大分子分辨率 | 更佳（MOPS缓冲离子迁移率低，条带更窄）【3】【4】 | 常规分辨率 |
| 能否混用 | 不能与Tris-甘氨酸体系混用【1】【3】 | — |
| 缓冲液循环 | 不需要（即无需内外槽液循环）【2】 | 一般需要 |
一句话总结：你的预制胶是Bis-Tris体系的（如NuPAGE），想分离大分子蛋白，选MOPS就对了【1】【3】。
二、核心配方：1×缓冲液里到底有什么？
根据多家供应商和标准配方，1× Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液的标准组成如下【1】【2】【5】：
| 成分 | 1×浓度 | 核心作用 |
|---|---|---|
| Tris Base | 50 mM | 维持缓冲液pH稳定【1】 |
| MOPS | 50 mM | 提供主要的缓冲能力（Good‘s缓冲剂，pKa≈7.2，在pH7.3附近缓冲能力强）【1】【3】 |
| SDS | 0.1%（w/v） | 使蛋白变性并带上负电荷【2】【5】 |
| EDTA | 1 mM | 螯合二价金属离子（如Mg²⁺、Ca²⁺、Zn²⁺），防止金属离子对电泳分离的干扰，并保护蛋白免受金属蛋白酶降解【1】【5】 |
| pH | 25℃时约为 7.3【1】【2】 | 不同品牌间可能存在±0.2的偏差，使用前请以产品说明书为准 |
三、怎么配？三种方案任你选
方案一：从零开始配1×工作液（1 L）
如果你有Tris、MOPS、SDS和EDTA单组分试剂，可以自己配【1】【5】：
| 组分 | 称量 |
|---|---|
| Tris Base | 6.06 g |
| MOPS | 10.46 g |
| SDS | 1.0 g |
| EDTA | 0.3 g |
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| ① | 称取上述试剂，加入约800 mL去离子水【5】 |
| ② | 搅拌至完全溶解（SDS需要一点耐心，应缓慢加入避免结块）【1】 |
| ③ | 用去离子水定容至1 L（最终体积为1 L，非加入1 L水）【5】 |
| ④ | 检查pH，应在7.3左右（如pH偏离7.3±0.2，可用1M Tris碱或1M HCl微调）【2】 |
方案二：配20×浓缩母液（1 L）
如果不想每次都从头配，可以先配20×浓缩液，使用时稀释20倍【1】【6】。
| 组分 | 称量 |
|---|---|
| Tris Base | 121.2 g |
| MOPS | 209.2 g |
| SDS | 20 g |
| EDTA | 6 g |
配制时建议先将Tris和MOPS溶于约600 mL水中，搅拌至溶解，再缓慢加入SDS，可加热至40-50℃加速溶解【6】。定容至1 L后，使用时取50 mL母液（取液前应充分摇匀），加去离子水定容至1 L，充分颠倒混匀10-15次后使用【6】【7】。
⚠️ 注意：如需无菌使用，应用0.22 μm滤膜过滤除菌，不可高温高压灭菌（SDS在高温下会分解或起泡）【1】【3】。
方案三：速溶颗粒——科研人的“懒人福音”【4】【7】
不想称量、不想调pH、不想担心批间差？直接买速溶颗粒——每袋可配制1 L 1×工作液，室温保存长达3年【4】。
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| ① | 烧杯中加入约600 mL去离子水，放一个磁力搅拌子 |
| ② | 将1袋速溶颗粒的全部内容物缓慢倒入烧杯中【4】 |
| ③ | 搅拌至完全溶解【4】 |
| ④ | 加去离子水定容至1 L【4】 |
| ⑤ | 即得1× Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液 |
四、省心之选：直接买现成的【4】【7】
如果追求省心省力、批次稳定，可以直接选择杭州富沃克生物科技有限公司的即用型Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液系列【7】：
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参考文献
[1] MOPS缓冲液速溶颗粒产品说明[EB/OL]. 生物在线.
[2] Tris-MOPS SDS-PAGE电泳缓冲液产品说明[EB/OL]. 江苏先丰纳米材料科技有限公司.
[3] Tris-MOPS-SDS缓冲液[EB/OL]. 生物谷（BioMart）, 2023-10-24.
[4] Tris-MOPS-SDS速溶颗粒产品说明[EB/OL]. LABLEAD, 2026-01-26.
[5] Tris-MOPS-SDS缓冲液产品说明[EB/OL]. 中科百抗.
[6] MOPS/ SDS Running Buffer [20X]产品说明[EB/OL]. G-Biosciences.
[7] Tris/MOPS/SDS Running Buffer (20×)产品说明[EB/OL]. 阿拉丁（Aladdin）.
