一、50× TAE是什么？

TAE全称是Tris-乙酸-EDTA缓冲液（Tris-acetate-EDTA）^[1] 。之所以先配成50倍的浓缩液，主要是为了储存方便、减少污染——取20 mL 50× TAE原液，加入去离子水或超纯水定容至1 L，混匀后即为1×工作液。请勿使用自来水或PBS稀释。

❗注意：不同文献在EDTA用量上有差异，原因在于EDTA存在多种形态（无水、二水、不同钠盐）。37.2 g Na₂EDTA·2H₂O是使用最广泛的版本。如果使用无水EDTA，则只需要18.6 g；如果使用0.5 M EDTA母液（pH 8.0） ，则加入100 mL。选购原材料时务必看清标签！

二、配制步骤（亲测版）

1. 称量：称取242 g Tris碱和37.2 g Na₂EDTA·2H₂O于1 L烧杯中^[2]。

2. 溶解：加入约600 mL去离子水，边搅拌边缓慢分批加入NaOH固体（约需18–22 g，具体以pH实测为准），调节pH至约8.0。

3. 加酸：待EDTA完全溶解至溶液澄清后,缓慢加入57.1 mL冰乙酸（注意通风！），继续搅拌混匀。

4. 定容：待溶液冷却至室温，加去离子水定容至1 L。

5. 保存：室温密封保存即可（建议6个月内使用）。若长期保存后出现沉淀，使用前37°C水浴加热并摇匀，不影响效果。如需长期无菌保存，可0.22 μm滤膜过滤后储存。

小贴士：EDTA在近中性pH下溶解极慢。建议先配0.5 M EDTA母液（pH 8.0） ——在EDTA悬浊液中加入NaOH搅拌至澄清，再用这个母液来配TAE，省时省力

三、几个容易被忽略的“避坑”要点

1. TAE不适合长时间电泳

TAE的缓冲能力比TBE小，长时间电泳（比 如超过4小时甚至过夜）会导致缓冲能力耗尽，条带可能跑偏或模糊。如果实验需要长时间跑，建议选用TBE或配备缓冲液循环装置。

2. 回收DNA片段首选TAE

TBE中含硼酸，会与琼脂糖形成复合物，降低DNA回收效率。所以但凡要做切胶回收的样本，首选TAE而不是TBE。这也是TAE在分子生物学实验室中“出镜率”最高的原因之一。

3. 大片段DNA用TAE效果更好

在脉冲场凝胶电泳（PFGE） 中，对于大于13 kb的DNA片段，TAE常被推荐使用，TAE的分离效果优于其他缓冲体系。基因组DNA、大质粒等大片段电泳，TAE是不错的选择。

4. 低温沉淀属正常现象

50× TAE在低温环境下可能会有结晶析出。别慌——37°C水浴加热并摇匀即可，不影响使用效果。

四、TAE vs TBE：一张表帮你选

省时省力，拿来即用

称量、调pH、EDTA溶解……这些琐事交给专业的来。杭州富沃克生物科技有限公司提供即用型50× TAE缓冲液，严格参照标准配方质控，开瓶稀释即可上机，帮你把宝贵时间留给真正的实验。

产品信息：50× TAE缓冲液（核酸电泳级），可直接用去离子水稀释50倍后使用。

联系方式

• 官网：www.fwkbio.com

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参考文献

[1] iGEM Thessaly. 50x TAE stock solution. iGEM 2020

[2] Behle A, Pawlowski A. Recipe for 50x TAE buffer. protocols.io, 2018. doi:10.17504/protocols.io.gtvbwn